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你知道各種細胞培養基的區別嗎?

來源:通蔚試劑(上海)有限公司   2019年08月09日 08:49  

現代的細胞培養已經具有固定的培養基配方,如DMEM、RPMI1640。它們大多屬于經典培養基。它們是如何發展起來的?

 

許多人做實驗只養一兩種細胞,也許只遇到一兩種培養基。但在歷*積累起來的經典培養基實際上已至少有十幾種。回顧這些培養基,也許能看到前人為發展細胞培養而做出的一些努力。

 

zui早的經典培養基是BME,是由美國生理學家Harry Eagle(1905-1992)在1955年開發的,用于培養HeLa細胞和小鼠成纖維細胞。他發現了細胞體外生長所必需的*營養,這就是BME的配方。它由氨基酸、維生素、無機鹽、D-葡萄糖和酚紅組成。其中維生素有9種,氨基酸有13種,包括10種必需氨基酸、半胱氨酸、酪氨酸和谷氨酰胺。

 

BME之后出現了一種改良型,即MEM。

MEM可同時用于貼壁和懸浮細胞,可培養HeLa, BHK-21, 293, MCF-7細胞等。它是由Harry Eagle在BME配方基礎上開發的。之后誕生了MEM培養基的改良配方,如GMEM、a-MEM和DMEM。

DMEM即意大利生理學家Dulbecco改良的Engle培養基。DMEM常用,能支持很多貼壁細胞生長,包括原代的成纖維細胞、神經元、HUVECs、平滑肌細胞以及一些細胞系如Hela(常用于癌癥和信號轉導研究)、293(常用于外源蛋白表達)、Cos-7(常用于轉染研究)等。

 

DMEM所含維生素的濃度大約是MEM的4倍,所含氨基酸大約比MEM高1倍,氨基酸種類則多3種,可以說營養更為豐富。

GMEM所含的氨基酸和維生素濃度比BME高1倍。它*初是MEM加上10%的磷酸胰蛋白?,用于培養BHK-21細胞,以及用于研究影響細胞增殖能力的遺傳因素。

 

a-MEM也是MEM的改良型,包括非必需氨基酸、丙酮酸鈉、硫辛酸、維生素B12、生物素和抗壞血酸,可培養角質細胞、原代大鼠星形細胞等。

Ham F-12培養基大約是在1965年由Ham引入,用于無血清培養CHO細胞(CHO細胞是美國遺傳學家Theodore T.Puck于1957年從一成年雌性倉鼠卵巢分離獲得的,在生物工程上應用廣泛)。和其他基礎培養基相比,F-12含有的成分更廣泛,包括鋅、腐胺、次黃嘌呤和胸苷,還可用于培養軟骨細胞和前列腺上皮細胞。

 

M199初是用于雞胚成纖維細胞的營養研究。 它具有廣泛的物種適用性,特別是用于培養未轉化細胞。M199廣泛用于病毒學和疫苗生產。與其他基礎培養基相比,培養基199含有*的成分,包括腺嘌呤、腺苷、次黃嘌呤、胸腺嘧啶和其他維生素。

 

RPMI 1640主要用于培養懸浮細胞。它含有還原劑谷胱甘肽和高濃度維生素(如肌醇、膽堿),還包括生物素、維生素B12等MEM、DMEM沒有包含的成分。

需要指出的是,經典培養基都不含蛋白質、脂類和生長因子,因此需要配合胎牛血清一起使用。

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