低溫冷凍腦損傷模型
低溫冷凍腦損傷模型是一種類似于人腦挫傷的動物模型,主要為血管源性腦水腫,是常用的顱腦損傷實驗模型。該模型具體制作方法:手術前大鼠禁食l晚,不禁水。動物稱重后,麻醉成功后,動物頭部固定于江灣Ⅰ型C立體定向儀上,頭部備皮,安爾碘消毒后,于中線切開頭皮,剝離骨膜,在冠狀縫后、人字縫前、矢狀縫右側顯微手術電鉆顱骨鉆孔。骨窗直徑為5mm,用于致傷和行顱內壓監測。將自制冷凍杯置入液氮中1min預冷,盛入液氮后迅速從液氮罐中取出,立即蓋上杯蓋,用冷凍杯底部與硬腦膜充分接觸15s,冷凍處硬腦膜和鄰近顱骨由白色恢復至周圍組織同樣顏色的時間一般為8~10s,表示冷凍良好。正常對照組動物不做麻醉和手術處理;假凍傷組與凍傷組同樣行麻醉和開顱手術,但不冷凍,以盛有37℃生理鹽水的冷凍杯與硬腦膜充分接觸15s行假冷凍。
術后進行顱內壓的測定:假凍傷組和凍傷組各取6只動物,在上述操作結束后立即監測顱內壓。將ALC-MPA型多道生物信號分析系統的顱內壓探頭由骨窗處向前方放置于顱骨下硬腦膜外,然后將硬腦膜及骨窗周圍顱骨外板和軟組織用無菌棉球拭干,用醫用耳腦膠封閉顱骨與硬腦膜之間的縫隙,骨瓣復位。骨窗邊緣的顱骨外板上鉆一直徑約1mm微孔,固定小螺絲釘1枚,后用自凝牙托水泥封閉骨窗,在此過程中,務必做到嚴密封閉。顱內壓持續監測6h,每間隔1h取2min的平均值作為測得值記錄,并進行統計學分析。
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