膠原酶

——動物組織消化利器

圖1：膠原酶

產品介紹

膠原酶（Collagenase）是一類能夠特異性的識別Pro-X-Gly-Pro序列（該序列高頻率出現在膠原中，很少發現于其他蛋白中），并切割該序列中的中性氨基酸（X）和甘氨酸（Gly）之間的肽鍵的肽鏈內切酶，且能夠水解結締組織中的膠原蛋白。

許多蛋白酶都能水解單鏈和變性的膠原多肽，但膠原酶是唯——種可以降解具有三股超螺旋結構的天然膠原纖維的蛋白酶，其廣泛存在結締組織內，其中有效的膠原酶是由厭氧細菌溶組織梭菌（Clostridium histolyticum）分泌的“粗”膠原酶。

翊圣膠原酶來源于溶組織梭菌（Clostridium histolyticum），是一種酶“粗”提物，不僅含有能夠降解天然膠原和網狀纖維的膠原酶，還含有其他的一些蛋白酶如多糖酶、脂酶等，能夠有效水解結締組織和上皮組織細胞外基質內的其他蛋白、多糖和脂質等，因此更適用于組織消化。

目前市面上的細菌膠原酶依據膠原酶的活性差異主要分為5種類型：膠原酶I型，II型，III型，IV型和V型等。

膠原酶的選擇

  *CDU = collagen digestion units

產品特性

1、消化效率高：溶組織梭菌的酶粗提物，對組織消化效率高。

2、依賴于活化劑：膠原酶需要借助二價陽離子如Ca²⁺、 Zn²⁺等活化酶的活性。

3、受抑制劑影響：膠原酶的抑制劑有EDTA 、EGTA等；二是重金屬離子（Hg²⁺,Pb²⁺,Cd²⁺）；還有一些化學試劑如Cysteine、histidine、DTT、2-mercaptoethanol、o-phenanthroline等對膠原酶也有抑制作用。

4、耐干擾性強：膠原不會受到培養細胞所用的血清影響。

更具競爭力的價格

  圖2：價格對比圖

FAQ

一、 使用方法：在Hank’s，Earle’s 或者其他平衡鹽溶液中溶解，推薦使用工作濃度0.05 % ~0.5 % (w/v) 

二、 存儲溫度： 2-8℃

三、 使用建議：

①對于膠原蛋白結構和生物合成研究，常使用更高純度的膠原酶制劑，不含其他蛋白水解活性。

②對于組織解離，常使用粗制膠原酶制劑，例如彈性蛋白酶，胰蛋白酶或木瓜蛋白酶等。

四、常見問題：

1、實驗過程中消化作用不佳

①如果是酶活不強或鈣離子不足導致，應在低溫干燥條件下儲存膠原酶，膠原酶溶液分裝后凍存

②如果是鈣離子不足導致，應將膠原酶溶液中鈣離子濃度設置為5mM。

2、使用過程中出現細胞死亡

①如果是蛋白酶過量，應減少蛋白酶接觸時間或是加入白蛋白或滅活血清

      ②如果是pH 改變應使用緩沖液（如HBSS）；經常檢查并重新調節pH
      ③如果氧氣太少，應給消化液通無菌空氣

3、實驗中出現細胞受損

 如果是蛋白酶過多導致，應減少蛋白酶用量或是加入白蛋白或滅活血清

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