①過夜冷消化

將取得的組織用 Hanks 液洗三次，剪成碎塊大小為 4 毫米左右，用 Hanks 液洗 2~3

次以除去血球和脂肪組織，再加入 0.25% 的胰蛋白酶，搖勻后放 4℃過夜，次日再用 Hanks 液洗滌，

棄去上清，共洗 2~3 次，然后，加入少量營養液吹打分散，細胞計數，按適當的濃度分瓶培養。

②多次提取消化法

多次提取消化法有以下三種：

1.熱消化多次提取 -- 將剪碎的細胞塊加入 0.25% 胰蛋白酶 37℃水浴中消化 15~20 分鐘，然后經洗

滌后用營養液分散制成細胞懸液，按合適的濃度分瓶培養，然后將留下的未*消化的組織按上述方法

操作，再消化提取細胞。

2.冷消化多次提取 -- 方法同上，只是消化溫度為 4℃。

3.先熱消化后冷消化 -- 將組織塊先用胰蛋白酶于 37℃下消化 20 分鐘經洗滌后用營養液分散，制成懸

液，剩余未消化的小組織塊經洗滌后用胰酶于 4℃下過夜，次日再提取細胞，分散成懸液，分瓶培養。