中文名稱:小鼠elisa試劑盒
規格:96T/48T
檢測波長:450nm
所需樣本體積:50-100ul
適用范圍:僅供科研
庫存:現貨
保存及有效期:2-8℃,六個月
檢測目的:用于測定血清,血漿及相關液體等樣本。
例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦斧液、細胞培養上清、組織勻漿等標本。
琛藝供應的種屬有:人、大鼠、小鼠、豚鼠、兔子、豬犬、牛羊、雞鴨、植物ELSA試劑盒等
上海琛藝實業長期代做人、大鼠、小鼠、兔子、豚鼠、豬、雞、犬、猴子、羊、牛等種屬elisa實驗。
小鼠elisa試劑盒以靈敏度較高、特異性較好的特點在上得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。我將操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給同行帶來一些啟發,提高試驗質量。下面分析ELISA試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法。
一、選擇試劑
選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
二、加樣
可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時);
3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒采血管混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
三、 孵育
可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。
解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
四、洗板
ELISA試劑盒可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。
解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
五、顯色
可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。
elisa試劑盒研發解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用;
2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
六、終止
可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
七、讀板
如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
ELISA試劑盒在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
一:ELISA試劑盒查驗技師應具有從事實驗室操作的基本素質和實踐經驗。能嫻熟操作實驗儀器、器械,具有一定總結和剖析疑問的才華,對ELISA試劑盒實驗中出現的意外狀況能及時妥善解決。
二運用校對過的微量移液器,打掃天然差錯。移液器準確與否對定量查看尤為主要。
三:仔細閱讀說明書嚴厲按照說明書懇求進行規范化操作。不一樣批號的試劑不可混用。值得改進的本地,重復實驗斷定樹立后才華改進。
四:ELISA試劑盒洗刷*
洗板不*,酶聯絡物本底顯色會出現假陽性。洗刷液要新鮮,現用現配,陳腐的洗刷液會出現本底增高現象,也或許出現假陽性。
五:嚴控反響時間
反響時間過長,酶失活;反響時間過短,酶聯絡物不能與血清中的微生物抗原抗體充分聯絡,生成物結構懈怠不健壯,簡單洗掉,都或許構成假陰性。
六:過保存期的試劑不能運用
留意ELISA試劑盒保存期,過保存期的試劑不能運用。
七:評估試劑的實用性
試劑的穩定與否,對準確率的高低到頭主要。在試劑啟用前,應進行陰、陽對照及樣品重復比照實驗。
顯色時間過短,參與中止液反響中止后,底物聯絡物的量過少,易出現假陰性。逾越顯色懇求時間后顯色,應判為假陽性,這或許與試劑本身有關。加顯色劑后當即顯色,不可報陽性,這或許是本底顯色的效果。
上海琛藝為您介紹如何靈活應用ELISA這個檢測方法以及如何去挑選ELISA試劑盒。
1、有些客戶會用OVA(卵清蛋白)做一些哮喘,過敏性腸炎的模型,后來會檢測粘膜特異性的sIgA以及血清里面IgG,IgE等指標。
2、對于一些小分子的檢測,比如前列腺素、糖皮質激素的檢測,我的理解是要用競爭法ELISA去檢測,也要購買采用這個方法的盒子。一般細胞因子的檢測,都是采用常規的夾心法ELISA檢測,因為因子分子量比較大,一般10幾個KD左右,很容易找到兩個或者多個抗原表位。而小分子很難找到兩個不同的表位,也就決定了包被抗體和檢測抗體無法同時結合小分子并固相化。解決方案就是酶標板上包被二抗,每個孔加入一定量的酶標的小分子,然后加樣品,再加不帶標記的檢測抗體,顯色底物。樣品的目的小分子的含量越高,吸光度越低。
3、對于胰島素的檢測,我還是推薦上海琛藝旗下的TSZ的檢測試劑盒,不管是放免還是ELISA,據說權在我們手中。
4、做實驗面向的ELISA試劑盒種屬主要是人,大鼠和小鼠,現在市面上雞、牛、馬、羊、兔各種指標的盒子都有售。
5、好多客戶有個誤區,拿來一個指標就想當然地嘗試用ELISA去檢測,其實應該多動腦,該檢測活性的檢測活性, ELISA試劑盒檢測方法簡單,靈敏度高,準確性高,特異性強等很多的優點。
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