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牛垂體提取物是角朊細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)的重要添加成分
牛垂體提取物（BPE）是由牛腦垂體制備的提取物，有研究表明BPE具有明顯改善人垂體腺瘤細(xì)胞體外無(wú)血清培養(yǎng)條件的作用,對(duì)離體培養(yǎng)的垂體腺瘤細(xì)胞增殖具有促進(jìn)作用。常用作無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)的生長(zhǎng)補(bǔ)充劑，可促進(jìn)上皮細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞和黑色素細(xì)胞增殖，廣泛用作各種上皮細(xì)胞和黑色素細(xì)胞培養(yǎng)中的補(bǔ)充劑。此外，其具有抗氧化能力，可對(duì)抗過(guò)氧化氫誘導(dǎo)的細(xì)胞壞死，蛋白質(zhì)氧化，膜破碎和DNA損傷。
BPE是無(wú)血清的促有絲分裂添加劑，含有天然生長(zhǎng)因子的*混合物，可與MCDB系列（MCDB170或MSDB154）或DMEM/Ham'sF12的基礎(chǔ)培養(yǎng)基組合使用。牛垂體提取物是角朊細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)的重要添加成分。
對(duì)于單層中上皮細(xì)胞的生長(zhǎng)，推薦濃度為35?70ug/mlBPE。通過(guò)使用優(yōu)化的基礎(chǔ)培養(yǎng)基如MCDB170或MCDB154，濃度可以降低。確定*BPE濃度的有效方法是在選擇的細(xì)胞上進(jìn)行簡(jiǎn)單的生長(zhǎng)測(cè)定。建議將產(chǎn)品分裝成單次使用體積，以避免反復(fù)凍融所引起的可能活性損失。BPE以溶液的形式提供，凍干粉會(huì)降低其生物活性。
生長(zhǎng)因子參與調(diào)節(jié)嗅鞘細(xì)胞增殖、分化及代謝功能,因此有望通過(guò)應(yīng)用其合理的序貫刺激形式,達(dá)到細(xì)胞數(shù)量地大量擴(kuò)增。目的:觀察牛垂體提取物、堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子及Forskolin對(duì)嗅鞘細(xì)胞增殖的影響及劑量-效應(yīng)關(guān)系。方法:采用原代培養(yǎng)技術(shù),從新生大鼠的嗅球分離培養(yǎng)嗅鞘細(xì)胞,并用差速貼壁+化學(xué)藥物+胰酶快速消化法純化培養(yǎng)嗅鞘細(xì)胞,添加牛垂體提取物、堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子及Forskolin3種促增殖因子及其組合。MTT法檢測(cè)各組嗅鞘細(xì)胞生長(zhǎng)的情況。
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