Gator非標(biāo)記生物分子分析儀傳感檢測生物分子與傳統(tǒng)的生物學(xué)檢測方法相比具有多種優(yōu)點,例如:操作簡便,省時,具有高的選擇性以及靈敏性等。因此,非標(biāo)記檢測方法有著很好的發(fā)展前景,并可應(yīng)用于醫(yī)學(xué)的研究中,例如:疾病診斷,治療以及預(yù)防。我們結(jié)合小分子探針構(gòu)建了非標(biāo)記的用于檢測酶活性以及金屬離子的生物傳感新方法。
第1部分:我們以苝酰亞胺衍生物(compound1)作為熒光探針,利用RNaseH可以水解RNA-DNA雜交雙鏈中RNA鏈的特點,構(gòu)建了一種檢測RNaseH酶活性的新方法。溶液中的RNA-DNA雜交雙鏈可以誘導(dǎo)compound1自集聚并引起溶液熒光的猝滅,當(dāng)在溶液中加入RNaseH酶時,RNaseH酶可以將雜交雙鏈中的RNA鏈水解,釋放出compound1單體,從而導(dǎo)致溶液的熒光強度增加,通過此方法可以有效的檢測RNaseH酶活性。
第二部分:利用芘衍生物為熒光探針,利用K+可以誘導(dǎo)富含G的核酸鏈形成G-四鏈體結(jié)構(gòu)的特點,構(gòu)建了一種檢測K+的新方法。溶液中含有K+時,可以誘導(dǎo)富含G的核酸鏈形成G-四鏈體,從而防止核酸鏈被S1核酸酶水解,當(dāng)溶液中加入芘衍生物時,核酸鏈可以誘導(dǎo)芘衍生物集聚并產(chǎn)生基激締合物熒光,利用此方法可以有效的檢測溶液中的K+。
Gator非標(biāo)記生物分子分析儀中Gator平臺基于Probe Life的生物薄膜干涉光譜技術(shù),可對治療性生物分子的不同研發(fā)階段實時檢測。Gator通過收集傳感器探針頂端結(jié)合分子數(shù)量的變化而引起的光干涉信號達到檢測的目的。這有利于蛋白-蛋白相互作用的研究:解離速率篩選,結(jié)合常數(shù)測定,是/否與靶抗原結(jié)合,親和力成熟和表位結(jié)合。
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