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產(chǎn)品名稱：HELF細胞|HELF人胚肺成纖維細胞 含STR
特點：細胞代數(shù)為4代以內，細胞耐藥倍數(shù)8倍以上；
包裝：內層無菌自封袋；防壓泡沫盒；外層防壓保溫氣泡袋；說明書
細胞來源：ATCC、sciencell、ICLC
貨期：1-2周
運輸方式：快遞運輸
售后：收到細胞后12天，如發(fā)現(xiàn)細胞有質量問題（如污染，死亡，快遞運輸?shù)仍颍r，應出具書面質量問題報告并及時通知銷售人員，我們將盡快為您解決！
- HELF細胞|HELF人胚肺成纖維細胞 含STR
- 三、細胞生長條件：
- 組成：
組份 | 數(shù)目 |
細胞 | 1 T-25瓶 |
細胞說明書 | 一份 |
- 細胞簡介：
生長特性： | 貼壁生長
|
細胞來源： | 從ATCC/中科院/協(xié)和醫(yī)院等地引進 |
培養(yǎng)條件： | 培養(yǎng)基：90%1640培養(yǎng)基 +10%FBS（推薦BI -04-001-1ACS*胎牛血清） 氣相：空氣95%，二氧化碳5% 溫度：37℃ |
培養(yǎng)： |
1.用75%酒精噴灑整個瓶消毒，將其平躺置于培養(yǎng)箱中進行2-3小時的緩沖，.然后置于無菌操作臺，打開瓶口，將其中的培養(yǎng)液去掉，再往其中加入5-6mL新鮮培養(yǎng)基并置于細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，根據(jù)細胞生長狀況及培養(yǎng)基顏色變化對其進行換液以及傳代； 2.待細胞長滿瓶底面積80%-90%，需要對其進行傳代，第yi次傳代比例為1:2。 3傳代步驟：將0.25%含EDTA胰酶置于37°預熱，倒掉培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，往培養(yǎng)瓶中加入1mlPBS，輕晃洗滌后棄去。往瓶中加1ml預熱好的胰酶，置于37°孵育消化（第yi次消化需時常取出置于顯微鏡下觀察，以顯微鏡下細胞觸角回收變圓、輕拍瓶壁見細胞脫落為*消化時間，記錄*消化時間，以便于下次消化），消化好后加入1ml*培養(yǎng)基終止消化。用移液槍輕輕吹打瓶壁上的細胞，使之*脫落，然后收集細胞懸液，1200rpm離心3min，棄上清，加入*培養(yǎng)基重懸細胞，進行傳代。
二、懸浮細胞 1.用75%酒精噴灑整個瓶消毒，然后置于無菌操作臺，打開瓶口，輕輕吹打后，將其中的細胞懸液轉移到離心管中，然后1200rpm離心3min，去上清； 2.將離心好的細胞轉移至T-25瓶中，并加入5-6mL新鮮培養(yǎng)基，然后將其置于細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，根據(jù)細胞生長狀況及培養(yǎng)基顏色變化對其進行換液（離心后去舊液，加入新鮮培養(yǎng)基）； 3.顯微鏡觀察細胞數(shù)目比較多時，對其進行傳代，第yi次傳代比例為1:2（離心后平均分成兩瓶培養(yǎng)）。
|
細胞總數(shù)： | 1~3*106 |
傳代周期： | 2-3天 |
傳代比例： | 1:2~1:4 |
換液頻率： | 2-3天 |
凍存液： | 90%FBS+10%DMSO |
四、注意事項：
1 收到細胞后首先觀察T-25瓶是否有損壞、漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
2 瓶中運輸?shù)呐囵B(yǎng)液不能重復使用，請換新鮮培養(yǎng)液培養(yǎng)
3 對于貼壁細胞，若大部分細胞漂浮，置于培養(yǎng)箱隔夜觀察，大部分漂浮細胞重新貼壁，表明細胞活力正常，繼續(xù)培養(yǎng)，剩余漂浮的細胞可以去掉；若大部分細胞仍然不貼壁，將漂浮的細胞離心收集，用臺盼藍染色鑒定細胞活力，并與本公司銷售人員及時聯(lián)系。
4 建議客戶收到細胞后不同倍鏡各拍幾張細胞的照片，記錄細胞狀態(tài)，如細胞狀態(tài)出現(xiàn)問題請于72h內與本公司銷售聯(lián)系，以便于更好的幫您解決問題，超過時間我段，本公司則默認細胞狀態(tài)良好，不免費對后續(xù)細胞狀態(tài)問題進行售后。
做細胞實驗的同學看過來。
選擇上海琛藝生物細胞有3個理由：
1、細胞狀態(tài)好，形態(tài)佳，易成活，是市面上比較好養(yǎng)的細胞之一;
2、物流迅速，復蘇好后發(fā)貨，次日就能到;
3、使用我司推薦的進口品牌血清進行培養(yǎng)實驗，效果更佳。
細胞培養(yǎng)常見問題及解決方法
問題 | 原因 | 解決方案 |
細胞生長緩慢 | 生長培養(yǎng)基使用不當 | 按照生產(chǎn)商的建議，使用相應的預熱生長培養(yǎng)基。 |
生長培養(yǎng)基中血清質量差 | 使用其他批次血清。 | |
傳代操作不當 | 按照生產(chǎn)商的建議消化時間及傳代比例進行操作。 | |
換液過于頻繁 | 降低換液頻率，參考生產(chǎn)商推薦的換液頻率。 | |
細胞傳代次數(shù)過多 | 使用傳代次數(shù)較少的健康細胞。 | |
細胞生長超過匯合狀態(tài) | 哺乳動物細胞傳代應在細胞處于對數(shù)期、未達到匯合狀態(tài)時進行，建議細胞密度達 80-90%傳代。 | |
細胞被支原體污染 | 將細胞、培養(yǎng)基和試劑丟棄；新取一只凍存細胞，并且使用新的培養(yǎng)基和試劑。 | |
細胞復蘇存活率低 | 細胞凍存不當 | 新取一只凍存細胞，并儲存在液氮中。將細胞儲存在液氮中，直至復蘇。 |
自行制備的凍存細胞無活性 | 將細胞按照生產(chǎn)商推薦的密度凍存。 | |
制備凍存細胞時使用傳代次數(shù)少的細胞。 | ||
嚴格按照生產(chǎn)商推薦的操作程序凍存細胞。請注意本手冊推薦的冷凍程序是凍存細胞的一般流程，只能作為指導原則使用。 | ||
新取一只凍存細胞。 | ||
細胞復蘇方法不當 | 嚴格按照生產(chǎn)商推薦的操作程序復蘇細胞。請注意本手冊推薦的解凍程序是復蘇細胞的一般流程，只能作為指導原則使用。 | |
確保冷凍細胞解凍迅速，接種前用預熱的生長培養(yǎng)基緩慢稀釋細胞。 | ||
復蘇培養(yǎng)基使用不當 | 使用生產(chǎn)商推薦的培養(yǎng)基。確保培養(yǎng)基使用前已經(jīng)預熱。 | |
細胞稀釋過度 | 按照生產(chǎn)商的建議，將解凍后的細胞高密度接種，以改善復蘇效果。 | |
處理細胞時動作不夠輕柔 | 凍存和復蘇過程對大多數(shù)細胞都會造成不利影 響。不要通過渦旋振蕩或者用力敲打培養(yǎng)瓶的方法使細胞脫落(培養(yǎng)昆蟲細胞時除外)，也不要高速離心細胞。 | |
凍存液中所用保護劑在儲存過程中未避光 | 如果未避光儲存，凍存保護劑會轉變?yōu)閷毎卸拘缘奈镔|；新取一只凍存保護劑，重新凍存細胞。 |
上海琛藝實業(yè)有限公司經(jīng)過數(shù)年的努力發(fā)展已迅速成為集產(chǎn)品研發(fā)、生產(chǎn)、經(jīng)營為一體的專業(yè)化生物工程公司。公司新引進細胞上千株，其中人的已通過STR鑒定的有幾百株，歡迎各位選購。。。。。。
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