【詳細描述】:
中文名稱:小鼠牛小腸堿性磷酸酶(CIAP)ELISA試劑盒
規格:48T/96T
包裝:elisa試劑盒正規包裝
品牌:酶科
儲存溫度::-20℃(較長時間不用時);2-8℃(頻繁使用時)
有效期:6個月
1-2個工作日發貨,提供免費代測服務,收到標本起一周內提供原始數據和終數據
ELISA各種樣本收集、處理、保存方法
1.血清標本收集、處理、保存方法:
用無熱原、無內毒素的試管或離心管采集血液標本,全血標本室溫放置1-2h或4℃過夜,然后4℃、3000rpm/min離心20min,小心收集上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長時間),避免反復凍融。避免使用溶血或高血脂的標本。
2.血漿標本收集、處理、保存方法:
根據樣本要求選擇EDTA或肝素鈉或枸緣酸鈉作為抗凝劑,用含抗凝劑的采血管或離心管采集血液標本,室溫混合20min左右,然后4℃、3000rpm/min離心20min,小心收集上清即為血漿。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長時間),避免反復凍融。避免使用溶血或高血脂的標本。
3.尿液標本收集、處理、保存方法:
用干凈容器收集尿液,4℃、3000rpm/min離心20min,小心收集上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長時間),避免反復凍融。
4.唾液標本收集、處理、保存方法:
用干凈離心管收集唾液,4℃、3000rpm/min離心20min,小心收集上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長時間),避免反復凍融。
5.細胞標本收集、處理、保存方法:
(1)細胞培養上清
取細胞培養上清到干凈離心管中,4℃、3000rpm/min離心20min,小心收集上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長時間),避免反復凍融。
(2)細胞裂解液
收集細胞培養液,4℃、3000rpm/min離心20min,棄去上清,用預冷的PBS(0.01M,PH7.4)洗滌三次。加入適量的預冷PBS或細胞裂解液(臨用前加入蛋白酶抑制劑)重懸細胞。通過反復凍融,使細胞充分裂解。然后4℃、10000rpm/min離心20min,除去細胞碎片,取上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長時間),避免反復凍融。
試劑盒組成及保存:
試劑盒組成 | 48孔配置 | 96孔配置 | 保存 |
說明書 | 1份 | 1份 | |
封板膜 | 2片(48) | 2片(96) | |
密封袋 | 1個 | 1個 | |
酶標包被板 | 1×48 | 1×96 | |
標準品 | 0.5ml×1瓶 | 0.5ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
標準品稀釋液 | 1.5ml×1瓶 | 1.5ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
酶標試劑 | 3 ml×1瓶 | 6ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
樣品稀釋液 | 3 ml×1瓶 | 6ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
顯色劑A液 | 3 ml×1瓶 | 6ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
顯色劑B液 | 3 ml×1瓶 | 6ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
終止液 | 3 ml×1瓶 | 6ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
濃縮洗滌液 | (20ml×20倍)×1瓶 | (20ml×30倍)×1瓶 | 2-8℃保存 |
小鼠牛小腸堿性磷酸酶(CIAP)ELISA試劑盒
三.注意事項
①儲存:試劑盒中各種試劑請按說明書提示合理存放。儲存及溫育過程中避免將試劑暴露在強光中。所有試劑瓶需旋緊以防止蒸發和微生物污染,否則可能會出現錯誤結果。
②酶標板:剛開啟的酶標板孔中可能會有少許水樣物質,此為正常現象,不會對實驗結果造成任何影響。暫時不用板條應拆下后放入備用自封袋,按推薦溫度存放。
③加樣:加樣和加同一試劑時,di一孔與后孔之間加樣時間間隔過大將導致不同的“預溫育”時間,從而明顯的影響到測量值的準確性及重復性,每次的加樣時間控制在 10 分鐘之內,推薦設置復孔。
④溫育:為防止樣品蒸發,實驗時必須給酶標板覆膜,洗板后應盡快進行下步操作,避免酶標板處于干燥狀態。嚴格遵守給定的溫育時間和溫度。
⑤洗板:洗滌過程中反應孔中殘留的洗滌液應在吸水紙或干布上拍干,勿將濾紙直接放入反應孔中吸水。讀數前要清除酶標板底部殘留的液體和手指印,以免影響酶標儀讀數。
⑥試劑配制:試劑盒在運輸過程中會使液體沾到管壁或瓶蓋,因此使用 1000 轉/分離心一分鐘,以使附著管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。取用前請用移液器小心吹打 4-5 次使溶液混勻。所有試劑請按說明書指示請配制。
⑦顯色時間的控制:加入底物后,請定時觀察反應孔的顏色變化(比如每隔五分鐘),如梯度已經很明顯,請提前加終止液終止反應,以避免顏色過深,影響酶標儀讀數。
⑧底物:請避光保存底物。在儲存和溫育時,避免強光直接照射。
⑨混勻:充分輕微混勻對反應結果尤為重要,使用微量振蕩器,使用低頻率,如無微量振蕩器,可以在反應前手工輕輕敲擊酶標板框混勻。
提示:不同批號的試劑盒組分不能混用(洗滌液和終止液除外)。
⑩關于樣品回收率
1)本試劑盒以測定重組豬胰蛋白酶的抗原性而非活力來推測殘留量,因此試劑盒中標準品采用胰蛋白酶的消光系數(E1%1cm=13.6D, 即當 A280nm=1.36 時,胰蛋白酶濃度為 1mg/ml)來計算其蛋白含量,以大限度保持質控的和穩定性。
2)不同計量方法以及產品純度的差別可以導致不同來源、不同批次產品中胰蛋白酶的蛋白含量不*一致,也會造成回收率的差異。
3)為避免上述因素影響,建議將用作回收率測試的樣品采用分光光度法(A280nm)估算蛋白含量,再稀釋至適合的濃度用于回收率測試,盡量減少回收率的誤差。
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