基因組DNA污染清除試劑詳細(xì)操作!
描述:
制備RNA 時(shí)基因組DNA 污染將會(huì)干擾下游PCR 或Northern Blot 實(shí)驗(yàn)。用RNase-free 的DNase 消化DNA 也會(huì)導(dǎo)致RNA 降解。基因組DNA 污染清除試劑不含DNA 酶,在強(qiáng)烈抑制RNA 酶的同時(shí)*清除RNA 樣品中的DNA 和蛋白質(zhì)污染,進(jìn)一步純化RNA。后通過(guò)乙醇沉淀回收得到的RNA 純度*,*不影響原有RNA 質(zhì)量和下游應(yīng)用。
用途:非酶法清除RNA 樣品中的基因組DNA 污染。每ml 試劑處理~100 μg RNA 樣品。
組成:50 ml 基因組DNA 污染清除劑,100 次。
儲(chǔ)存:4℃避光儲(chǔ)存。
使用方法:
根據(jù)起始RNA 溶液的體積,按比例加入所需試劑。以下操作以100 μl RNA 溶液為例。除非RNA 溶液中RNA 濃度很低,為方便操作可用高壓滅菌過(guò)的蒸餾水將不足100 μl 的RNA樣品的體積補(bǔ)充到100 μl。
1. 每100 μl RNA 溶液加入500 μl 基因組DNA 污染清除試劑。充分混勻,冰育1 分鐘。
2. 加入自備的lv仿100 μl。充分混勻,冰上孵育1 分鐘。
3. 12000 rpm 低溫離心10 分鐘。
4. 取上清約300 μl 轉(zhuǎn)移到新管。應(yīng)留下少量上清勿觸動(dòng)含DNA 的中間相,否則重新離心。
5. 加2-2.5 倍上清體積的無(wú)水乙醇,充分混勻,冰上或-20C 孵育20 分鐘。如果取出的上清液量較多,此步驟可加入0.6-1 倍上清液體積的異丙醇沉淀。
6. 12000 rpm 低溫離心10 分鐘。棄上清。
7. 加500 μl 70%乙醇,振蕩洗滌沉淀。12000 rpm 低溫離心10 分鐘。棄盡上清。
8. 敞開管口,空氣干燥RNA 沉淀。
9. 加入適量自備的蒸餾水或緩沖液溶解RNA 沉淀。1% 普通瓊脂糖凝膠電泳檢查RNA。
基因組DNA污染清除試劑詳細(xì)操作!
相關(guān)產(chǎn)品
免責(zé)聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來(lái)源:化工儀器網(wǎng)”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品,未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的,應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用,并注明“來(lái)源:化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者,本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任。
- 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來(lái)源(非化工儀器網(wǎng))的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網(wǎng)贊同其觀點(diǎn)和對(duì)其真實(shí)性負(fù)責(zé),不承擔(dān)此類作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體、網(wǎng)站或個(gè)人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時(shí),必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來(lái)源,并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任。
- 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問(wèn)題,請(qǐng)?jiān)谧髌钒l(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系,否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。