產品名稱：BIU-87/DDP人膀胱癌順鉑耐藥株 已通過STR鑒定
規格：70%密度的25cm2培養瓶的細胞一瓶
特點：細胞代數為4代以內，細胞耐藥倍數8倍以上；
包裝：內層無菌自封袋；防壓泡沫盒；外層防壓保溫氣泡袋；說明書
細胞來源：ATCC、sciencell、ICLC
貨期：1-2周
運輸方式：快遞運輸
售后：收到細胞后12天，如發現細胞有質量問題（如污染，死亡，快遞運輸等原因）時，應出具書面質量問題報告并及時通知銷售人員，我們將盡快為您解決！

注：耐藥細胞培養操作流程和普通細胞培養方法基本一致，只是在培養中會加藥維持篩選壓力

本公司培養的細胞采用胰蛋白酶-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法，并通過上皮細胞培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10^5cells/瓶；細胞經PCK/TG免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

參數規格

 1） 含量：>1x106 個/mL

 2） 污染：支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性

 3） 規格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

可選擇干冰運輸及發送復蘇存活細胞方式：

 （1）干冰運輸，收到后立即轉入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復蘇；

 （2）存活細胞，收到后應繼續生長，傳代達到細胞生長狀態良好時，再進行凍存。具體操作見細胞培養步驟。

 （3）收到細胞后請拍照，3天內如果發現污染，請及時拍照與我們聯系。

 用途：僅供科研使用。

BIU-87/DDP人膀胱癌順鉑耐藥株 已通過STR鑒定

 1） 收到細胞后，請檢查是否漏液，如果漏液，請拍照片發給我們。

 2） 請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態，去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養約2-3h。

 3） 棄去T25瓶中的培養基，添加6ml新的*培養基。

 4） 如果細胞長滿（90%以上）請及時進行細胞傳代。

 5） 接到細胞次日，請檢查細胞是否污染，若發現污染或疑似污染，請及時與我們取得聯系。

  細胞培養步驟

 一．培養基及培養凍存條件準備：

 1） 準備L-15培養基；胎牛血清，10%；雙抗，1%。

 2） 培養條件： 氣相：空氣，100%。 溫度：37攝氏度。

 3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配。

 二． 細胞處理：

 1） 復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入250px皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。

 2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。

 對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：

 1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

 2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。

 3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。

 4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

 注：次傳代推薦傳代比例為1:2，以后傳代比例可根據客戶需要自己決定。

 3） 細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。

 下面T25瓶為例；

 1．細胞凍存時，棄去培養基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，細胞變圓脫落后，加入2ml*培養基終止消化，可使用血球計數板計數。

 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至*終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。

 3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

 ARPE19-GFP人視網膜上皮細胞注意事項

 1.收到ARPE19-GFP人視網膜上皮細胞后，若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們聯系。

 2.收到細胞先不開瓶蓋，瓶身擦拭酒精后放在培養箱靜置2-4小時（視細胞密度而定）穩定細胞狀態。接著在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照（建議收細胞時就整體外觀拍一張照片，觀察培養基的顏色和是否有漏液情況，隨后在顯微鏡下拍下細胞狀態，100*，200*各一張），觀察記錄細胞在運輸過程中是否有污染情況。作為我方進行銷售依據。

 3.由于細胞狀態受環境、操作和運輸等多方面因素影響，故本公司只保證客戶收到細胞后一周內的細胞狀態，故客戶需要售后時需出示收到細胞的時間證明及客戶提供收貨時間和發現問題后客服人員溝通的時間證明，期間間隔時間不能大于7天。

 4.所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

合作單位

經過多年的不懈努力，我公司合作的單位有：復旦大學華山醫院，中山醫院，山西中醫藥大學：貴州達靈藥業，武漢巴菲爾生物，杭州啟新生物，容大生物，鄭州大學，東南大學，成都華健未來生物，同濟大學，廣州中醫藥大學，河南大學，上海大學，柳岸生物技術有限公司，中山大學附屬第三醫院等等。。。。。。

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