_{細胞培養實驗中用量多的就是細胞培養基，雖然細胞培養試驗基本技術大同小異，但是每種細胞的培養條件卻相差甚遠。若偏離某種細胞所需的培養條件，則會導致細胞表達不同的表型。}

    _{因此，在實驗前，需要熟悉自己所使用的細胞系，并在實驗中嚴格遵守所有產品的操作說明。} 

    _{在實驗過程中，作為實驗小白，我們應該如何應對相關問題呢？現在我們一起來看看！}

    _{一、如何挑選適合自己細胞生長的培養基呢？}

    _{選擇培養基沒有確切的標準，有幾點建議可供參考：}

    _{1.建立某種細胞株所用的培養基應該是培養這種細胞首xuan的培養基。可以查閱ATCC或在購買細胞株時咨詢供應商。}

    _{2.根據細胞株的特點、實驗的需要來選擇培養基。如小鼠細胞株多選RPMI1640。}

    _{3.其他實驗室慣用的培養基不妨一試，許多培養基可以適合多種細胞。}

    _{4.也可用多種培養基培養細胞，觀察其生長狀態，可以用生長曲線、集落形成率等指標判斷，根據實驗室結果選擇*培養基，這是客觀的方法，但比較繁瑣。}

    _{二、如何正確地保存培養基？}

    _{普通的培養基放置在2-8℃冰箱避光保存，若已開封建議3周內使用。未開封的培養基，一般可穩定保存1年。}

    _{三、培養基中酚紅的作用是什么？導致培養基顏色變化的原因有哪些？}

    _{酚紅在培養基中被用來作為pH值的指示劑：中性時為紅色，酸性時為黃色，堿性時為紫色。}

    _{1.培養基顏色變黃，原因有：培養基中細胞代謝產物為酸性，培養瓶受污染，細菌代謝產酸等導致。}

    _{2.培養基顏色偏暗紅色，原因有：培養基保存在4℃冰箱中，培養基內的二氧化碳逐漸溢出，造成培養基越來越偏堿性，而培養基中的酸堿指示劑酚紅會隨著堿性增加而更偏暗紅。}

    _{四、我感覺自己的培養基污染了，這要怎么進行測試呢？}

    _{取0.1ml液體培養基涂布到無菌蛋白凍niu肉膏培養基上37℃培養24h，觀察有無雜菌生長（肉眼即可觀察到）。}

    _{五、如果我的培養基中添加了血清和抗生素后，可長期保存嗎？}

    _{一旦培養基中添加了血清和抗生素，建議避光保存在4℃冰箱且在2周內用完。因為一些抗生素和血清的基本成分在解凍后就開始降解了。}

    _{六、培養基怎么有沉淀了，這是怎么回事？怎么預防處理沉淀？}

    _{1.首先判斷培養基是否已經污染，其次，若沉淀為絮狀沉淀則可能是加入血清引起的，此沉淀對細胞培養無影響。若沉淀為結晶，有可能是因為向培養基里加入的輔助試劑降低了培養基的溶解度，使一些無機鹽析出。}

    _{2.可應用離心、過濾的方法去除這些沉淀，盡可能地減少血清凍融次數。}

    _{七、那我什么情況下可以使用不加酚紅的培養基呢？}

    _{研究表明，酚紅可以模擬固醇類激素（特別是雌激素）的作用。為避免固醇類反應，培養細胞時，用不加酚紅的培養基；一些研究人員在做流式細胞檢測時，為了避免酚紅干擾檢測，也使用不加酚紅的培養基。}

    _{八、為什么培養基中會含有L-谷氨酰胺和丙酮酸鈉，它們的作用是什么？}

    _{L-谷氨酰胺脫掉氨基后可作為培養細胞的能量來源參與蛋白質的合成和核酸代謝。丙酮酸鈉可以作為細胞培養中的替代碳源。盡管細胞更傾向于以葡萄糖作為碳源，但是如果沒有葡萄糖的話，細胞也可以代謝丙酮酸鈉。}