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進口胎牛血清質量檢定指標

來源:重慶市華雅干細胞技術有限公司   2019年12月19日 17:20  
   進口胎牛血清是一種性狀、外觀 淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體。
  進口胎牛血清質量檢定指標:
  1、進口胎牛血清內毒素檢測:凝膠法和動態濁度法 要求內毒素含量≤10EU/ml。
  2、化學檢定:包括滲透壓(240~340)、pH(7.0~8.0)、總蛋白含量(3.5~5.0%)、血紅蛋白 (≤0.02%)。
  3、進口胎牛血清微生物檢查:細菌和真菌——直接培養法、噬菌體——噬斑法和增殖法 支原體——培養法和DNA染色法 、牛病毒——細胞培養法。要求均為陰性。
  4、促細胞生長測定:(SP2/0-Ag14標準規定)
  a.大增殖濃度≥1.0×106個/ml、倍增時間≤20小時 克隆率=(陽性孔平均數/培養孔總數)×100%。
  b.貼壁效率( VERO細胞、二倍體細胞等);10%血清――50或100個細胞/孔。
  c.貼壁效率(%)=(每孔克隆平均數/每孔存活的培養細胞平均數)×100 相對貼壁效率=被測血清貼壁效率/參考血清貼壁效。
  如何儲存和解凍血清才不會使產品質量受損?
  將血清從冷凍箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室溫下使之全融。但必須注意的是,融解過程中必須規則地搖晃均勻。
  長時間儲存在2-8℃時,血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見的混濁。因此,推薦在-20℃以下儲存血清,并避免反復凍融。
  我們建議血清應保存在-2O℃。若存放于4℃時,請勿超過一個月。若一次無法用完一瓶,建議無菌分裝血清至恰當的滅菌容器內,再放回冷凍。
  進口胎牛血清其功效與作用有以下幾點:
  1、提供對維持細胞指數生長的激素,基礎培養基中沒有或量很少的營養物,以及主要的低分子營養物;
  2、提供結合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他激素等,能結合或調變它們所結合的物質活力;
  3、有些情況下結合蛋白質能與有毒金屬和熱原質結合,起到解毒作用;
  4、是細胞貼壁、鋪展在塑料培養基質上所需因子來源;
  5、起酸堿度緩沖液作用;
  6、提供蛋白酶抑制劑,使在細胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活,保護細胞不受傷害。

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