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VCaP細胞|人前列腺癌細胞VCaP 已通過STR鑒定

來源:上海琛藝實業有限公司   2019年12月21日 11:26  

VCaP細胞|人前列腺癌細胞VCaP 已通過STR鑒定

運輸和保存:
人前列腺癌細胞;VCaP圖片視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養,如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養瓶充滿*培養基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態,如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
細胞名稱 人前列腺癌細胞;VCaP圖片
形態特性 上皮細胞
生長特性 貼壁生長
特征特性 1997從一位不受激素影響的前列腺癌患者脊椎轉移灶中建立了這株細胞。先在小鼠中進行異種移植傳代,隨后進行體外培養。體內及體外都對雄性激素敏感。
培養條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 優質胎牛血清,10%
傳代方法 消化3-5分鐘。1:2。3天內可長滿。
傳代情況 P(39+5)
凍存條件 *培養基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR Amelogenin:X,Y;CSF1PO:10,12;D13S317:11,12;D16S539:9;D18S51:13;D19S433:13;D21S11:31;D2S1338:17,25;D3S1358:14,15;D5S818:12;D7S820:9,12;D8S1179:12,13;FGA:21,26;TH01:9.3;TPOX:8,11;vWA:18,19
同工酶
染色體
細胞特性:
1)】人前列腺癌細胞;VCaP圖片組織來源于實驗動物的正常眼組織。
2)細胞鑒定:細胞角蛋白-18(CK-18)免疫熒光染色為陽性。
3)經鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。
5)細胞生長方式:上皮樣,不規則細胞,貼壁培養。
注意事項:
(1)凍存前細胞狀態,細胞在對數生長期,細胞密度適合,剛剛發生細胞融合,過密或連成片的細胞狀態不好,而且消化時不容易分散;
(2)凍存的密度不宜過低,10的6次方-7次方的數量級比較好,我凍存的細胞一般T25培養瓶(5*107),一瓶凍一管(1.5ml凍存管),10cm培養皿(大概10的8次方個細胞)分成兩管。
(3)消化和吹打,切忌胰酶消化過度,吹打不可太用力,不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養基吹打哦,不是加入凍存液再吹打。
(4)離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細胞株而言要求不是很嚴格,我從10%-90%都用過,問題不大,個人認為10%-20%可以了,能節約處就節約點嘛!另外,凍存液可以在處理細胞前配置,放在4度冰箱預冷。細胞離心后直接用預冷的凍存液重懸,移入凍存管。
(5)關于“慢凍”,傳統的方法,LLC細胞凍存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更長,-80度過夜,后液氮。對于條件較好的實驗室和細胞凍存數量多的實驗室,推薦使用程序降溫盒,內裝異丙醇,在-80度并內可以逐漸降溫,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。

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