為了更好地運用猴ELISA試劑盒,定時對其進行清洗是很有必要的,下面我們來細心說說其清潔關鍵。
猴ELISA試劑盒的清潔關鍵:
1. 洗板
① 保證洗液注滿各孔,洗板針疏通,洗完板后在吸水紙(選擇潔凈、無或少塵的吸水資料)上輕輕拍干;
② 合理安排,或多用幾臺洗板機。
2. 讀板
應保證酶標板清潔,在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸;盡可能完結ELISA技術規范自動化,有用前進技術質量。
3. 加樣
① 標本為血清:將血液先天然寄存1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:有必要運用含抗凝劑的血液標本搜集管,采血后有必要當即倒置采血管混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內技術,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
② 加樣后及時放入孵箱。
③ 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
④ 如果選用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
⑤ 標本較多時,請分批操作。
只有清潔還不夠,要完結一項漂亮的ELISA實驗,不但要做足實驗的準備,還要熟練掌握操作方法及技巧,后便是實驗的成果了。那么猴ELISA試劑盒實驗的成果怎么判別剖析呢?
1.儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值
2.以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應的IFN-Y標準品濃度為橫坐標(X),做得相應的曲線,樣品的IFN-Y含量可根據其OD值由標準曲線換算出相應的濃度,再乘以稀釋倍數;
或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,即為樣品的實際濃度。
3.技術值范圍:0-400pg/ml
4.敏感度:1.0pg/ml
ELISA的實驗成果可用肉眼觀察顏色反應的深淺作出判別,也可用分光光度計作測定。當然,后者更為正確。而肉眼觀察更為簡潔,而且也有必定正確性。據Adler(1980)報告,目測為±1+、2+、3+、4+相當于分光光度計測定O.D值。
不管用哪種方法判定成果,每次都要有陽性和陰性參考血清作對照,這樣可以消除一些外界的影響要素。
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