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用于分光光度計的光度準確度測試的材料, 應該是純度高、穩定性好的物質。這些物質中較主要的是鉻酸鉀( K2 CrO4 , 一般在堿性溶液中)、重鉻酸鉀( K2 Cr2 O7 , 一般在酸性溶液中) 、硝酸鉀、中性濾光片等。在堿性溶液中的鉻酸鉀是一種好材料, 但是因為含有堿性, 不能儲藏在普通玻璃容器中, 而需要儲藏在石英器皿中, 硝酸鉀本身不大穩定。這些都限制了它們的使用。因此, 建議選擇易于純化又溶于酸性介質中的物質, 并且它們的稀溶液也是很穩定的。因此, 重鉻酸鉀的0. 005mol/ L H2 SO4 溶液經常被使用。許多科學家認為, 用紫外濾光片來測試分光光度計的光度準確度, 具有很大的優點。因為它們的穩定性更好, 又便于攜帶, 還有許多優點將在后面討論。
分光光度計的光度準確度測試方法, 目前國內外各生產廠家作法不一, 其主要原因是各國的國家標準不同; 如美國國家標準規定: “選擇合適的標準參比材料, 在規定的波長處, 連續測10 個吸光度或透射比讀數, 取10個讀數的平均值, 實際吸光度或透射比與觀測值的平均值之差, 即為光度準確度”。美國國家標準還規定了計算光度準確度的標準偏差S 的方法; 規定指出吸光度準確度用AA 表示, 則有式( 4-10) 、式( 4-11) 中, S 為標準偏差; Ai或Ti為每次測量時吸光度或透射比的讀數值; Aa或Ta為吸光度或透射比的平均值; n為測量次數( 一般取5～7 次)。
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