新春佳節來臨之際,祝福每一位勇敢的湖北人民,祝福每一位還在一線與病毒作頑強斗爭的醫護人員,祝福你們在新的一年里身體安康、闔家幸福。接下來介紹 轉基因植物Bt基因PCR檢測試劑盒操作流程
以下原則:
1、引物應用核酸系列保守區內設計并具有特異性。
2、 產物不能形成二級結構。
3、引物長度一般在15~30堿基之間。
4、G+C含量在40%~60%之間。
5、堿基要隨機分布。
6、引物自身不能有連續4個堿基的互補。
7、引物之間不能有連續4個堿基的互補。
8、引物5′端可以修飾。
9、引物3′端不可修飾。
10、引物3′端要避開密碼子的第3位。
PCR反應體系與反應條件:
標準的PCR反應體系
10×擴增緩沖液 10ul
4種dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加雙或三蒸水至 100ul
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