動物ELISA試劑盒是經過酶聯免疫吸附反響進行實驗來技術特定物質的試劑盒,試劑盒中會有不同濃度的規范樣品,在酶標條中經過固相的抗原或抗體,酶標記的抗原或抗體,酶作用的底物反響可形成規范曲線,從而進行實驗樣品的測定.
那么動物ELISA試劑盒實驗的基本原理究竟是什么呢?總結起來包括3條:
1.抗原或抗體可經過共價鍵與酶銜接形成酶結合物,而此種酶結合物仍能堅持其免疫學和酶學活性;
2.抗原或抗體能以物理性地吸附于固相載體外表,可能是蛋白和聚苯乙烯外表間的疏水性部分相互吸附,并堅持其免疫學活性;
3.酶結合物與相應抗原或抗體結合后,可根據參加底物的色彩反響來判定是否有免疫反響的存在,并且色彩反響的深淺是與標本中相應抗原或抗體的量成正比例的,因而,能夠按底物顯色的程度顯示實驗成果。
不過,影響ELISA實驗成果的要素許多,所以加強各個環節的質量保證才干充分發揮其原理的優點。Elisa實驗是一種敏感性高,特異性強,重復性好的實驗確診辦法。因為其試劑穩定、易保存,操作簡便,成果判斷較客觀等要素,已廣泛應用在免疫學查驗的各領域中。
在動物ELISA試劑盒實驗血清為何要稀釋?有兩個原因:
1.比賽按捺對比明顯,應稀釋比賽物;
2.以下降非特異性反應,使特異性的抗原抗體反應充分體現出來。
血清稀釋用一般的PBS即可,可加1%的BSA,能有用下降ELISA本底,當然假如你嫌費事我覺得用生理鹽水代替PBS也不大。不管你是用直接比賽仍是直接比賽,血清的稀釋倍數必定要事前確認,但也不必一點點,你做一個預實驗即可,挑選OD在1.0左右的稀釋倍數,即你的ELISA中陰性孔OD在1.0,這么作出來的曲線對比靈敏。
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