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LNCaP-GFP人前列腺癌綠色標記細胞 處理方法

來源:上海琛藝實業有限公司   2020年03月30日 16:46  

產品名稱: LNCaP-GFP人前列腺癌綠色標記細胞 處理方法

中文名稱: 人前列腺癌細胞-熒光素梅標記

特征特性: 人前列腺癌細胞LNCaP克隆FGC是從一位50歲白人男性(血型B+)的左鎖骨淋巴結針刺活檢中分離,該患者經確診為前列腺癌轉移。 這株細胞對5-α-二氫睪酮(生長調節子和酸性磷酸脂酶產物)有響應。 這株細胞并不形成一致的單層,而是形成集落,在傳代時可以用滴管反復吹吸打碎。 它們僅僅輕輕地吸附在基底上,不形成匯合,很快使培養基變酸。 生長很慢。 傳代后48小時內不應擾動。 當培養瓶封包后,多數細胞從培養瓶底分離,懸浮在培養基中。 收到后,在通常培養單層細胞的條件下培養24到48小時,以合細胞再貼壁。 此后可以換上新鮮培養液。 如果需要,培養瓶內容物可以收集,300g離心15分鐘,以10毫升培養液重懸并培養到一個單獨的培養瓶中。請使用Corning的Cellbind培養瓶培養。

細胞污染: HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌檢測陰性。

培養條件: RPMI-1640+10%胎牛血清+1%雙抗+2%HEPES+1%Glutamax+1%Sodium pyruvate

細胞凍存步驟: 待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,細胞變圓脫落后,加入2ml*培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。明舟生物按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

復蘇細胞步驟: 將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。

細胞傳代步驟: 如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

本公司生產的小鼠甲狀腺濾泡上皮細胞采用胰蛋白酶-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法,并通過上皮細胞培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10^5cells/瓶;細胞經PCK/TG免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

 

 LNCaP-GFP人前列腺癌綠色標記細胞 處理方法參數規格

 

1) 來源:甲狀腺

 

 

 

2) 形態:上皮細胞樣

 

 

 

3) 含量:>1x106 個/mL

 

 

 

4) 污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性

 

 

 

5) 規格:T25瓶或者1mL凍存管包裝

產品相冊

 

 

 

可選擇干冰運輸及發送復蘇存活細胞方式:

 

 

 

(1)干冰運輸,收到后立即轉入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復蘇;

 

 

 

(2)存活細胞,收到后應繼續生長,傳代達到細胞生長狀態良好時,再進行凍存。具體操作見細胞培養步驟。

 

 

 

(3)收到細胞后請拍照,3天內如果發現污染,請及時拍照與我們聯系。

 

 

 

用途:僅供科研使用。

 

LLC-luc小鼠肺癌細胞-熒光素| LLC-luc細胞

 

小鼠胚胎干細胞接收后的處理:

 

 

 

1) 收到細胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發給我們。

 

 

 

2) 請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態,去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養約2-3h。

 

 

 

3) 棄去T25瓶中的培養基,添加6ml新的*培養基。

 

 

 

4) 如果細胞長滿(90%以上)請及時進行細胞傳代。

 

 

 

5) 接到細胞次日,請檢查細胞是否污染,若發現污染或疑似污染,請及時與我們取得聯系。

 

 

 

 細胞培養步驟

 

 

 

一.培養基及培養凍存條件準備:

 

 

 

1) 準備L-15培養基;優質胎牛血清,10%;雙抗,1%。

 

 

 

2) 培養條件: 氣相:空氣,100%。 溫度:37攝氏度。

 

 

 

3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配。

 

A。僅供研究之用。

 

運輸保存:采用干冰保存運輸。收到細胞時,若干冰已經*融化,請立即將細胞復蘇培養;若尚留有干冰,請立即將細胞放入液氮中保存待用,請按條件貯存細胞,切不可將細胞置于高溫環境。

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