ELISA試劑盒的運用要害:
1、按照說明書中標明的時間、加液的量及次第進行溫育操作。
2、運用潔凈的塑料容器裝備洗滌液。運用前充沛混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
3、試劑應按標簽說明書儲存,運用前康復到室溫。稀稀往后的標準品應丟掉,不行保存。
4、標本由于冷藏時Ig G聚組成多聚體,Fib非特異性吸附,重復凍融機械切力致使蛋白分子受損。
5、實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,避免蛻變。
6、運用一次性的吸頭避免穿插污染,吸取中止液和底物A、B液時,避免運用帶金屬部分的加樣器。
7、加樣時禁絕,槍頭吸樣時插入樣本液面下2mm為宜。
8、不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前運用。
9、參與試劑的次第應共同,以保證一切反應板孔溫育的時間相同。
10、應該留意試劑4°c冷藏時水化層構成,蛋白分子散布失常。
11、底物A應蒸發,避免長時間翻開蓋子。底物B對光活絡,避免長時間露出于光下。避免用手觸摸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
12、常選用的溫度有43、37°c、室溫、或許4°c等。37°c較常用,4°c效果較好,但孵育時間有異。
13、要留意內源如風濕因子,補體,高濃度非特異性免疫球蛋白,異嗜性抗體及某些自身抗體等;外源如標本溶血,細菌污染,儲存時間過長及凝結等要素影響。
14、洗滌酶標板時應充沛拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
15、在運用ELISA試劑盒時應留意:2-8℃保存(特殊情況在外)、同一種類不同批號試劑不能混用、不同種類試劑盒顯色劑不能混用。
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