陰離子交換色譜柱是指離子交換色譜中的固定相中的一些帶電荷的基團,這些帶電基團通過靜電相互作用與帶相反電荷的離子結合。如果流動相中存在其他帶相反電荷的離子,按照質量作用定律,這些離子將與結合在固定相上的反離子進行交換。
陰離子交換色譜柱鍵合固定相是以高純度具有良好機械穩定性的硅膠為基質,通過使用高純度鍵合試劑在硅膠上鍵合季銨強陰離子交換基團,具有季銨和苯基官能團的混合化學結構。這種強陰離子交換相與疏水相的混合模式可以為各種有機化合物如芳香族或脂肪族羧酸和磺酸等提供高效和高選擇性的分離。
陰離子交換色譜柱基本原理:
離子交換色譜是蛋白純化技術中常用的一種純化方法,其原理是指被分離物質所帶的電荷可與離子交換劑所帶的相反電荷結合,這種帶電分子與固定相之間的結合作用是可逆的,在改變pH或者用逐漸增加離子強度的緩沖液洗脫時,離子交換劑上結合的物質可與洗脫液中的離子發生交換而被洗脫到溶液中。由于不同物質的電荷不同,其與離子交換劑的結合能力也不同,所以被洗脫到溶液中的順序也不同,從而被分離出來。
陰離子交換色譜柱通常在高壓下運行。如果管路連接不緊,將會導致有機溶劑和注入樣品的泄漏,從而對操作人員的健康產生影響。一旦發生泄漏,應佩戴適當的手套進行處理。另外當打開色譜柱時還應采取適當的保護措施,以防止微小的硅膠顆粒進入呼吸道。
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