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四月技術總結交流大鼠ELISA標準曲線的繪制

來源:通蔚試劑(上海)有限公司   2020年04月06日 22:32  

在綿綿春雨的伴隨之下,四月已將近過四分之一。在這個月中,您都有哪些收獲呢?公司結識了幾位客戶,并為濟南大學齊魯醫院張老師、山東西醫科大學宋老師等客戶解決實驗技術問題。今天上午,我公司技術有對四月技術做出總結,與大家交流大鼠ELISA試劑盒標準曲線的繪制。

一、大鼠ELISA試劑盒標準曲線繪制方法 
①ELISA實驗中樣品都要做復孔或三孔,然后計算每個濃度標準品的平均OD值,復孔的變異系數應該小于20%。
②平均OD值減去空白孔的OD值。
③制作標準曲線。
 以減去本底后的OD值為X軸,標準品的濃度為Y軸,利用作圖軟件得出一個合適的計算方法。建議使用合適的軟件來作圖,比如CurveExpert 1.4。這款軟件能夠給出很多種方法(比如直線、半對數、對數、四參數方程等)并從中選擇一條zui合適的方程。要想檢驗某條曲線是否與表中數據吻合,可以將標準品的濃度作為未知數,將對應的OD值帶入該方程,計算出標準品的濃度,得到的結果應該與實際濃度很接近(+/-10%)。選擇擬合度zui高的那條曲線。

三、溫馨提示
如果樣品的OD值超過標準曲線的zui高值,在實驗前應該先將樣品稀釋從而得到準確的濃度。樣品的zui終度應該是計算出的濃度乘以稀釋倍數。

二、測定多個酶標板時是否可以使用同一條標準曲線?
在測定不同板中的樣品時,每一個板都對應一條標準曲線。技術錯誤或者不同的孵育情況,環境條件都會引起酶標板之間產生不同結果。一條標準曲線測定的樣品值必需是在相同環境下產生的,否則就是無效值。 

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