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elisa試劑盒試驗原理

來源:研域生物技術(上海)有限公司   2020年05月12日 08:50  

elisa試劑盒運用雙抗體夾心法測定標本中大白鼠類風濕因子(RF)水平。用純化的大白鼠類風濕因子(RF)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中順次加入類風濕因子(RF),再與 HRP 符號的類風濕因子(RF)抗體結合,構成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗刷后加底物 TMB 顯。TMB 在 HRP 酶的催化下轉化成藍,并在酸的效果下轉化成終究的黃。彩的深淺和樣品中的類風濕因子(RF)呈正相關。用酶標儀在 450nm 波長下測定吸光度(OD 值),經過規范曲線計算樣品中大白鼠類風濕因子(RF)濃度。

elisa試劑盒注意事項
1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡 15-30 分鐘后方可運用,酶標包被板開封后如未
用完,板條應裝入密封袋中保存。
2.濃洗刷液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗刷時不影響成果。
3.各步加樣均應運用加樣器,并常常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間
控制在 5 分鐘內,如標本數量多,推薦運用排槍加樣。
4. elisa試劑盒請每次測定的同時做規范曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本 OD 值
大于規范品孔孔的 OD 值),請先用樣品稀釋液稀釋必定倍數(n 倍)后再測定,計
算時請zui后乘以總稀釋倍數(×n×5)。

 

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