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PCR完成后，建議將反應(yīng)液于1000× g (大約4000 rpm) 離心1～3 min以沉淀血細(xì)胞碎片，之后取上清進(jìn)行下游分析。該步驟可有效去除多種血液組分。當(dāng)使用高濃度血液模板時(shí)此步尤為重要，因?yàn)榻?jīng)過PCR循環(huán)，反應(yīng)管中會(huì)存在大量的血細(xì)胞碎片。這些碎片會(huì)干擾下游的檢測(cè)，如瓊脂糖電泳檢測(cè)。注意：由于血液本身的原因，PCR 結(jié)束后在 PCR 管的底部會(huì)出現(xiàn)透明凝膠狀物質(zhì)，此為正常現(xiàn)象。
溫和氣單胞菌PCR試劑盒注意事項(xiàng)：
1. 盡量使用新鮮抗凝血。若凍存血，應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2. 解凍后2× Blood Master Mix可能出現(xiàn)渾濁，冰上放置1-2 min，待溶液澄清后，上下顛倒混勻，不影響試劑性能。
3. 電泳檢測(cè)時(shí)，切勿使用含有 SDS 的Loading Buffer，否則在電泳時(shí)會(huì)在泳道中出現(xiàn)一大團(tuán)拖尾亮帶，影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
4. 建議擴(kuò)增片段長(zhǎng)度1 kb以內(nèi)，以便擴(kuò)增效率jia。
5. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
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