植物類黃酮含量檢測試劑盒說明書

來源：上海研謹生物科技有限公司 2020年09月02日 12:41

植物類黃酮含量檢測試劑盒說明書

注意：正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定。

規格：100T/48S

類黃酮是一類多苯化合物，屬于植物次生代謝物，對人體具有消炎，抗菌，降血脂，清除體內羥自由基，預防癌癥等作用。

天平、烘箱、粉碎儀、篩子、超聲破碎儀、60%乙醇、離心機、可見分光光度計/酶標儀、微量玻璃比色皿/96 孔板、蒸餾水。

一、測定操作表

1、分光光度計或酶標儀預熱 30min 以上，調節波長至 470nm，蒸餾水調零。

2、操作表

	對照管	測定管	標準管	空白管
樣本待測液（µL）	60	60
標準溶液（μL）			60
蒸餾水（μL）				60
試劑一（µL）	15	15	15	15
混勻，室溫靜置 5min
試劑二（µL）		15	15	15
混勻，室溫靜置 5min
試劑三（µL）	120	120	120	120
60%乙醇（µL）	105	90	90	90
混勻，37℃水浴 45 min，10000g，10min 離心取上清，取 200µL 于微量玻璃比色皿/96 孔板中測定 A470。計算ΔA=A 測定-A 對照，ΔAˊ=A 標準-A 空白。

1、標準曲線繪制

以單寧酸濃度為橫坐標，ΔAˊ為縱坐標繪制標準曲線 y=kx+b，將ΔA 帶入方程求得 x； 2、按樣本鮮重計算

類黃酮含量（mg/g 鮮重）= x×V 提取÷W=x÷W 3、按樣本蛋白濃度計算

類黃酮含量（mg/ mg prot）= x×V 提取÷(Cpr×V 提取) = x÷Cpr

V 提取：加入提取液體積，1mL；W：樣本鮮重，g；Cpr：樣本蛋白質濃度，mg/mL。

1、 OD 值大于 0.4，樣品適當稀釋再測定，注意計算公式里乘以稀釋倍數。

2、顯色完成后立即測定，2 小時后吸光值會下降。

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