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淺述高速逆流色譜儀的工藝原理

來源:上海同田生物技術(shù)股份有限公司   2020年09月14日 10:10  
  高速逆流色譜儀是一種新的液相色譜技術(shù),利用液液兩相的逆流分配,在沒有固體填料、不需使用固態(tài)固定相的情況下,而是利用離心力產(chǎn)生的恒定力將固定相保留在由管道連接的一系列的腔體中,實(shí)現(xiàn)復(fù)雜化學(xué)物質(zhì)的混合物分離。它以液體溶劑為固定相,螺旋柱在行星運(yùn)動(dòng)時(shí)產(chǎn)生的離心力,使互不相溶的兩相不斷互相混合,同時(shí)保留其中的一相,使用恒流泵連續(xù)輸入另一相,樣品溶質(zhì)在兩相之間反復(fù)分配,按分配系數(shù)的次序,被依次洗脫出來,它替代了傳統(tǒng)制備型液相色譜的填充柱。
  它不用任何固態(tài)的支撐物或載體。 它利用兩相溶劑體系在高速旋轉(zhuǎn)的螺旋管內(nèi)建立起一種特殊的單向性流體動(dòng)力學(xué)平衡,當(dāng)其中一相作為固定相,另一相作為流動(dòng)相,在連續(xù)洗脫的過程中能保留大量固定相。
  在高速逆流色譜儀的運(yùn)行過程中,色譜柱線圈在公轉(zhuǎn)和自轉(zhuǎn)的二維方向上高速旋轉(zhuǎn),維持很高的離心力,即“G”力,它與公轉(zhuǎn)半徑、公轉(zhuǎn)半徑、旋轉(zhuǎn)速度等因素有關(guān),其目的是將固定相保持在色譜柱線圈中,而不被流動(dòng)相推出,“G”力的大小會(huì)體現(xiàn)在固定相保留率上,因而固定相保留率是衡量一臺(tái)高速逆流色譜儀的重要指標(biāo),固定相保留率在儀器出廠和安裝調(diào)試過程中,都可以測(cè)定出來;首先利用恒流泵在低速旋轉(zhuǎn)情況下將固定相填充到色譜柱線圈中,然后在高速旋轉(zhuǎn)情況下將流動(dòng)相注入到色譜柱線圈中,測(cè)量出固定相被推出的體積,固定相保留率=(色譜柱線圈體積-固定相被推出的體積)/色譜柱線圈體積,它是一臺(tái)儀器的綜合性能指標(biāo),直接決定樣品純化過程中的分離度。
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