手機(jī)版
化工儀器網(wǎng)手機(jī)版
化工儀器網(wǎng)小程序
官方微信
公眾號(hào)：chem17
掃碼關(guān)注視頻號(hào)
膠原酶是從溶組織梭狀細(xì)胞芽孢桿菌提取制備的，主要水解結(jié)締組織中膠原蛋白成分。當(dāng)擬消化的組織較硬，內(nèi)含較多結(jié)締組織或膠原成分時(shí)，用胰蛋白酶解離細(xì)胞的效果較差，這時(shí)可采用膠原酶解離細(xì)胞法。 膠原酶僅對(duì)細(xì)胞間質(zhì)有消化作用而對(duì)上皮細(xì)胞影響不大。因此適于消化分離纖維性組織、上皮及癌組織，可使上皮細(xì)胞與膠原成分分離而不受損害。常用劑量為*終濃度200U/ml（約為1mg/mL）或0.03%~0.3%。膠原酶分為Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ型以及肝細(xì)胞膠原酶，要根據(jù)所要分離消化的組織類(lèi)型選擇膠原酶類(lèi)型。
關(guān)于膠原酶的配制和保存：
1.配制的緩沖液：膠原酶應(yīng)該用氏液來(lái)配。不能用三蒸水因?yàn)闈B透壓太低細(xì)胞不能耐受，也不能用培養(yǎng)液因?yàn)槠渲械某煞謴?fù)雜對(duì)消化有影響，*也不用氏液因?yàn)镃a2+Mg2+離子易與一些成分結(jié)合形成沉淀影響分離（但這是理論上，我曾經(jīng)試過(guò)結(jié)果也還不錯(cuò)），PBS文獻(xiàn)上沒(méi)見(jiàn)過(guò)，但應(yīng)該理論上可以用的
2.配制的方法：
書(shū)上是36.5攝氏度攪拌溶解2h；4攝氏度過(guò)夜；0.22um過(guò)濾除菌；
但網(wǎng)上有人的方法是：室溫下直接溶，好溶，溶完直接0.22um過(guò)濾除菌，據(jù)說(shuō)也可行；
3.配制的濃度：1mg/ml、0.1-0.5%、0.025%（不同組織采用不同濃度）
4.配置后保存方法：
有的人推薦現(xiàn)用現(xiàn)配；
4度存放，*1~2周內(nèi)用完；
長(zhǎng)時(shí)間貯存宜在-20攝氏度，用前可放37度溶解，但溶解時(shí)間不能過(guò)久，防止酶活性受影響；
5.消化組織時(shí)間：取決于消化液濃度和組織類(lèi)型，一般消化時(shí)間為2－3小時(shí)或者4度過(guò)夜
以上就是這篇文章的大致內(nèi)容，看完這文章，你有了解到你想知道的內(nèi)容嗎?如果你想了解更多，歡迎關(guān)注我們的網(wǎng)站，我們會(huì)定期的更新一些新的內(nèi)容供大家瀏覽閱讀。
相關(guān)產(chǎn)品
免責(zé)聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來(lái)源：化工儀器網(wǎng)”的所有作品，均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品，未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的，應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用，并注明“來(lái)源：化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者，本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任。
- 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來(lái)源（非化工儀器網(wǎng)）的作品，目的在于傳遞更多信息，并不代表本網(wǎng)贊同其觀(guān)點(diǎn)和對(duì)其真實(shí)性負(fù)責(zé)，不承擔(dān)此類(lèi)作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體、網(wǎng)站或個(gè)人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時(shí)，必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來(lái)源，并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任。
- 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問(wèn)題，請(qǐng)?jiān)谧髌钒l(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系，否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。
采購(gòu)中心