植物蛋白提取試劑盒在利用液氮充分磨碎植物組織的同時,采用特殊的試劑對植物細胞釋放出來的蛋白進行沉淀,并使用蛋白酶抑制劑抑制蛋白酶活性,很大程度地保持所抽提蛋白質的完整性;而且蛋白抽提物呈干粉狀,有利于蛋白質的長期保存。
植物蛋白提取試劑盒特點:
1、提取的蛋白質是包括稀有蛋白在內的植物細胞的全蛋白質;
2、可以進行50×100mg植物組織樣品的提取;
3、經過適當處理后,可以用于2D電泳、等電點聚焦等實驗;
4、對植物細胞的裂解效果和植物細胞的非蛋白質成分去除效果好;
5、不需要超速度離心,可以同時處理多個樣品。
植物蛋白質的提取方法基本上有這幾種:鹽析法、有機溶劑法和等電點法。
1、鹽析法
原理:鹽析法是指在溶液中加入大量的無機鹽,可使蛋白溶解度降低沉淀析出。鹽析法主要用于蛋白質的分離純化。常作鹽析的無機鹽有硫酸鈉、硫酸鎂、硫酸銨等。
2、有機溶劑法
原理:機溶劑引起蛋白質沉淀的主要原因是加入有機溶劑使水溶液的介電常數降低,因而增加了兩個相反電荷基團之間的吸引力,促進了蛋白質分子的聚集和沉淀。有機溶劑引起蛋白質沉淀的另一種解釋認為與鹽析相似,有機溶劑與蛋白質爭奪水分子,致使蛋白質脫除水化膜,而易于聚集形成沉淀。
3、等電點法
原理:在等電點時,蛋白質分子以兩性離子形式存在,其分子凈電荷為零(即正負電荷相等),此時蛋白質分子顆粒在溶液中因沒有相同電荷的相互排斥,分子相互之間的作用力減弱,其顆粒很容易碰撞、凝聚而產生沉淀,所以蛋白質在等電點時,其溶解度小,容易形成沉淀物。等電點時的許多物理性質如黏度、膨脹性、滲透壓等都變小,從而有利于懸浮液的過濾。
植物蛋白提取試劑盒用于植物組織中提取總蛋白,試劑盒中的裂解液含有蛋白酶抑制劑,作用溫和,可快速獲得總蛋白,可用于免疫印跡實驗等基礎研究實驗,由于含有酶抑制劑,不能用于研究蛋白激酶的研究。
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