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高效液相色譜儀主要由色譜泵及控制器、進樣器、色譜柱、檢測器和數據處理及控制五大部分組成，分離原理是一個物理過程，流動相攜帶著待分析化合物和其他一些共存物質流過色譜柱，利用不同物質在固定相上的保留時間不同，從而出峰時間不同而達到分離，利用保留時間定性，峰高或者峰面積定量，在將分離后的各個成分依次通過一紫外檢測器時就可檢測出各化合物的濃度來。
高效液相色譜法有“三高一廣一快”的特點：
1、高壓：流動相為液體，流經色譜柱時，受到的阻力較大，為了能迅速通過色譜柱，必須對載液加高壓。
2、高效：分離效能高。可選擇固定相和流動相以達到分離效果，比工業精餾塔和氣相色譜的分離效能高出許多倍。
3、高靈敏度：紫外檢測器可達0.01ng，進樣量在μL數量級。
4、應用范圍廣：百分之七十以上的有機化合物可用高效液相色譜分析，特別是高沸點、大分子、強極性、熱穩定性差化合物的分離分析，顯示出優勢。
5、分析速度快、載液流速快：較經典液體色譜法速度快得多，通常分析一個樣品在15～30 min，有些樣品甚至在5min內即可完成，一般小于1h。此外HPLC還有色譜柱可反復使用、樣品不被破壞、易回收等優點。
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