手機版
化工儀器網手機版
化工儀器網小程序
官方微信
公眾號：chem17
掃碼關注視頻號
激光共聚焦顯微鏡有激發(fā)針孔和探測針孔，激發(fā)針孔和探測針孔共軛(共焦)，共焦點即被探測點，被探測點所在的平面為共焦平面。
激發(fā)光經激發(fā)針孔后成為點光源，然后通過二色鏡反射和物鏡聚焦點狀照射在樣品上，樣品被激發(fā)產生的發(fā)射光經同一物鏡，聚焦在探測針孔。探測針孔后面是光電倍增管，非焦平面的光就不能通過針孔(pinhole)被光電倍增管檢測。
激光共聚焦顯微鏡的針孔(Confocal pinhole)一般指探測針孔(detection pinhole)，Confocal pinhole的直徑一般自動設置成和艾里斑(airy disc)直徑一致。
艾里斑是點光源通過理想透鏡成像時，由于衍射而在焦點處形成的光斑。中央是明亮的圓斑，周圍有一組較弱的明暗相間的同心環(huán)狀條紋，把其中以一暗環(huán)為界限的中央亮斑稱作艾里斑。
激光共聚焦顯微鏡的針孔和艾里斑的直徑大小一樣，將有84%的聚焦光到達光電倍增管，圖像的信噪比好。Confocal是逐點激發(fā)和逐點檢測，因此有更窄的點擴散函數(Point spread function， PSF.
Confocal側向分辨率高于一般的光學顯微鏡，r(lateral)=0.61 λexc/NA(obj)，物鏡的軸向分辨率不如側向分辨率，r(axial)=1.4 λexc n/NA(obj)2
小的針孔將有更好的Z軸分辨率，但需更強的信號。
激光共聚焦顯微鏡優(yōu)點
1、以激光為光源，在相應的熒光探針標記后，對樣本進行逐點掃描，逐層獲得二維光學橫斷面圖像，具有“細胞CT”的功能，并可通過計算機三維重建軟件支持，獲得三維圖像，并可以任意角度旋轉，觀察細胞，組織立體形態(tài)和空間關系;
2、可以對活細胞和組織進行無損傷的觀察，動態(tài)測量細胞內的Ca離子濃度和pH值等活細胞生理信息;
3、可對細胞膜的流動性，細胞間通訊，細胞融合，細胞骨架彈性測量等，可用作“光刀子”完成細胞內“外科手術”。這一技術可以對活細胞和組織進行原位動態(tài)定量的觀察和測量。
免責聲明
- 凡本網注明“來源：化工儀器網”的所有作品，均為浙江興旺寶明通網絡有限公司-化工儀器網合法擁有版權或有權使用的作品，未經本網授權不得轉載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經本網授權使用作品的，應在授權范圍內使用，并注明“來源：化工儀器網”。違反上述聲明者，本網將追究其相關法律責任。
- 本網轉載并注明自其他來源（非化工儀器網）的作品，目的在于傳遞更多信息，并不代表本網贊同其觀點和對其真實性負責，不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網站或個人從本網轉載時，必須保留本網注明的作品第一來源，并自負版權等法律責任。
- 如涉及作品內容、版權等問題，請在作品發(fā)表之日起一周內與本網聯(lián)系，否則視為放棄相關權利。
采購中心