按照抗原抗體反應的結合步聚,免疫熒光法可分為以下三種:
直接法:
用熒光素標記的特異性抗體直接與相應的抗原結合,以檢查出相應的抗原成分。
間接法:
先用特異性抗體與相應的抗原結合,洗去未結合的抗體,再用熒光素標記的抗特異性抗體(間接熒光抗體)與特異性抗體相結合,形成抗原一特異性抗體一間接熒光抗體的復合物。在此復合物上帶有比直接法更多的熒光抗體,所以,此法較直接法靈敏。
補體法:
用特異性的抗體和補體的混合液與標本上的抗原反應,補體就結合在抗原抗體復合物上,再用抗補體的熒光抗體與之相結合,就形成了抗原一抗體一補體一抗補體熒光抗體的復合物。熒光顯微鏡下所見到的發出熒光的部分即是抗原所在的部位。補體法具有敏感性強的優勢,同時適用于各種不同種屬來源的特異性抗體的標記顯示,在各種不同種屬動物抗體的檢測上為常用的技術方法。
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