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高效液相色譜儀(HPLC)是分析實(shí)驗(yàn)室常用的測試儀器之一，其應(yīng)用越來越廣泛。此種儀器在使用過程中，難免會出現(xiàn)各種各樣的問題，并將直接影響到所測數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性和儀器的正常工作。
色譜柱是高效液相色譜儀主要的部件，被測物質(zhì)能否被很好的分離和測定，色譜柱的性能起著決定性的作用。因此，在日常工作中，應(yīng)特別注意色譜柱的正確使用和維修保養(yǎng)，以延長色譜柱的使用壽命。
色譜柱的使用和保養(yǎng)
1、使用預(yù)柱和保護(hù)柱
預(yù)柱(pre-column)安裝于泵和進(jìn)樣器之間，它給色譜柱中的流動相提供了*的平衡，并防止了對柱填料有破壞作用的組分或污染物進(jìn)入色譜柱。保護(hù)柱(guardcolumn)可以阻擋能夠牢固地吸附于色譜柱上的組分進(jìn)入色譜柱，保護(hù)柱應(yīng)與色譜柱的填料相同。預(yù)柱和保護(hù)柱可以經(jīng)常更換，而不需要經(jīng)常更換色譜柱，這就延長了色譜柱的使用壽命。
2、防止氣體進(jìn)入色譜柱
有些色譜柱(如凝膠柱)是不允許氣泡進(jìn)入的，否則將會使柱效降低甚至形成微小的難以驅(qū)除的氣室。因此，為了防止氣泡進(jìn)入色譜柱，一定要使用經(jīng)過脫氣的流動相，并且要嚴(yán)格按照下列步驟來安裝色譜柱。
a.拆卸下色譜柱入口處的密封螺絲，觀察是否有溶劑滲出；
b.如有溶劑滲出，即可將色譜柱接到管路上，以避免氣泡的進(jìn)入；
c.如無溶劑滲出時，表明色譜柱的此端已經(jīng)進(jìn)去空氣了，此時，可將色譜柱的出口端接到進(jìn)樣閥上，以流動相來反方向沖洗色譜柱，以便將柱內(nèi)的空氣排除。以0.2ml/min的小流量來沖色譜柱，如果溶劑的流速太快或者是壓力突然的上升都將會導(dǎo)致柱性能的降低；
d.如果流出的溶劑里不含有氣泡，說明柱內(nèi)的氣體已經(jīng)被排出了，再將色譜柱以正確的方向接好，這樣氣泡就進(jìn)不到色譜柱里面了。
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