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技術(shù)分享:ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)小技巧
對于ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)新手們來說，一場實(shí)驗(yàn)下來還是有一定難度的，那是因?yàn)樗麄冞€沒有掌握一些實(shí)驗(yàn)中的小技巧，掌握了實(shí)驗(yàn)技巧之后，用ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)會容易很多。今天為大家分享的文章中包含了ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)的要求、方法等技術(shù)。新手小白們還不趕快收藏起來！
1.加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
2.合理安排檢測量，以免反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長。
3.吸取液體時(shí)，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。
4.要盡量做雙孔實(shí)驗(yàn)，這樣才既能保證數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性，又能反映出試劑盒的精密度。
5.樣品稀釋液應(yīng)用加液器加注，并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性。
6.為防止樣品蒸發(fā)，試驗(yàn)時(shí)將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi)，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜。
7.未使用完的酶標(biāo)板或者試劑，請于2-8℃保存。辣根過氧化物酶標(biāo)記抗人IgG工作液請依據(jù)所需的量配置使用。請勿重復(fù)使用已稀釋過的辣根過氧化物酶標(biāo)記抗人IgG工作液。
8.ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中，加樣后及時(shí)放人孵箱，標(biāo)本較多時(shí)，要分批操作。按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間，防止孵育時(shí)間人為延長，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。
9.剩余樣品及廢棄物應(yīng)經(jīng)121℃高壓蒸汽滅菌30分鐘，或用5.0g/L次氯酸鈉等消毒劑處理30分鐘后廢棄。
10.人ELISA試劑盒洗滌時(shí)各孔均需加滿液體，防止孔口有游離酶不能洗凈。
11.每次實(shí)驗(yàn)留一孔作為空白調(diào)零孔，該孔不加任何試劑，只是后加底物溶液及2N H2SO4。測量時(shí)先用此孔調(diào)OD值至零。
12.手工洗板時(shí)每次加入洗滌液后。應(yīng)靜置15～30s，不要將一個(gè)酶標(biāo)孑L中的洗滌液濺入另一酶標(biāo)孔中，防止交叉污染。甩去洗滌液后將酶標(biāo)板放在毛巾或吸水紙上拍干。
13.對樣本的結(jié)果有疑問時(shí)需要使用其他檢測方法進(jìn)行驗(yàn)證。
14.沒有去離子水或雙蒸水時(shí)，可以使用娃哈哈純凈水配制溶液，切勿使用自來水。
15.在使用微量加樣器時(shí)，吸取不同瓶子中液體后要更換槍頭，即使吸取標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
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