生物芯片制備方法描述
生物芯片,又稱蛋白芯片或基因芯片,該技術(shù)系指將大量探針?lè)肿庸潭ㄓ谥С治锷虾笈c帶熒光標(biāo)記的DNA或其他樣品分子(例如蛋白,因子或小分子)進(jìn)行雜交,通過(guò)檢測(cè)每個(gè)探針?lè)肿拥碾s交信號(hào)強(qiáng)度進(jìn)而獲取樣品分子的數(shù)量和序列信息。
包括原位合成和預(yù)合成后點(diǎn)樣。
原位合成:適用于寡核苷酸,通過(guò)光引導(dǎo)蝕刻技術(shù)。已有P53、P450,BRCAI/BRCA2 等基因**的基因芯片。
預(yù)合成后點(diǎn)樣:是將提取或合成好的多肽、蛋白、寡核苷酸、cDNA、基因組DAN等通過(guò)特定的高速點(diǎn)樣機(jī)器人直接點(diǎn)在芯片上。該技術(shù)優(yōu)點(diǎn)在于相對(duì)簡(jiǎn)易低*,被國(guó)內(nèi)外廣泛使用。
接觸式點(diǎn)樣:是指打印針從多孔板取出樣品后直接打印在芯片上。打印時(shí)針頭與芯片接觸。優(yōu)點(diǎn)是探針密度高,通常一平方厘米可打印2500個(gè)探針。缺點(diǎn)是定量準(zhǔn)確性及重現(xiàn)性不太好。
非接觸式點(diǎn)樣:針頭與芯片保持一定距離。優(yōu)點(diǎn)是定量準(zhǔn)確重現(xiàn)性好,缺點(diǎn)是噴印的斑點(diǎn)大,密度低。通常一平方厘米只有400點(diǎn)。但是**公司能把噴印點(diǎn)直徑大小由150-100μm降到30-25μm。可將哺乳動(dòng)物整個(gè)基因組DNA點(diǎn)陣于一張芯片上成為可能。
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