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SNU349細胞;人透明腎癌細胞說明書

來源:青島捷世康生物科技有限公司   2021年05月14日 11:23  
  • 產(chǎn)品名稱: SNU349細胞;人透明腎癌細胞
  • 細胞數(shù)量: 1*10^6
  • 細胞種屬: 人源
  • 生長特性: 貼壁
  • 培養(yǎng)基: DMEM
  • 細胞凍存: 液氮凍存(凍存液基礎培養(yǎng)基+20%FBS+10%DMSO)
  • 細胞運輸: 干冰運輸(2ml凍存管)或活細胞運輸(T25瓶)
注意事項
凍存細胞接收后的處理:
1.干冰運輸,收到細胞后立即轉(zhuǎn)入-80℃冰箱短暫中轉(zhuǎn)或直接復蘇;
2.收到細胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰已經(jīng)*揮發(fā)、凍存管瓶蓋破裂脫落,請立即拍照后與我們聯(lián)系。
復蘇細胞接收后的處理:
1.收到細胞后,請首先檢查培養(yǎng)瓶是否破損或漏液,培養(yǎng)液是否混濁,如有漏液及培養(yǎng)液混濁情況請立即拍照把圖片發(fā)給我們。
2.75%酒精消毒瓶身后放培養(yǎng)箱中靜置4-6h后,在顯微鏡下確認細胞狀態(tài)并拍照100倍和200倍的照片,若有貼壁細胞脫落,可收集上清離心,將沉淀用新的培養(yǎng)基接種至新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中。
3.建議收到當天不要消化處理,如果細胞長滿90%,可選擇傳代處理。
4.如您收到細胞3天內(nèi)沒有反饋相關問題,出現(xiàn)的細胞問題將不提供免費重發(fā)服務。
SNU349細胞;人透明腎癌細胞細胞培養(yǎng)方法:
1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。

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