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高純硅膠色譜柱的兩種在線結(jié)合及操作方法介紹
高純硅因其優(yōu)良的機(jī)械強(qiáng)度和表面易改性等特征，已成為應(yīng)用廣泛的色譜柱填料。高純硅膠色譜柱具有柱效高、選擇性好及分析速度快等特點(diǎn)，因而被廣泛用于分離極性小分子如藥物，而用于糖、肽或蛋白質(zhì)分離較少。
高純硅膠色譜柱的在線結(jié)合目前主要有兩種方式：
一種是使用切換閥，將萃取柱和色譜分析柱連接，讓色譜流動相把萃取柱上富集的樣品全部轉(zhuǎn)移到色譜分析柱（直接方式）。
另一種是間接方式，采用和離線固相萃取一樣的凈化方式。樣品組分收集后，用萃取儀內(nèi)置的進(jìn)樣器取10-20微升的組分注入色譜分析柱。
二階在線固相萃取。它先采用間接方式的在線固相萃取作為一階段的樣品凈化，組分經(jīng)過溶劑修飾后再通過直接在線固相萃取進(jìn)行富集。這種二階在線固相萃取，先用一階去除大部分樣品的干擾物。所使用的萃取柱和普通的離線固相萃取一樣，可以是C18、離子交換、石墨化炭黑、親和色譜等類型。二階固相萃取的作用是富集和進(jìn)一步凈化。因?yàn)闃悠芬呀?jīng)比較干凈，二階壽命得以延長。
下面要為大家介紹的是高純硅膠色譜柱的操作方式：
1、在條件允許情況下，在使用前對按照說明書方法進(jìn)行柱效測試。以確保色譜柱的正常。
2、所有硅膠基質(zhì)色譜柱使用溫度應(yīng)低于60℃。
3、樣品
將樣品溶解在流動相或極性相近的溶劑中。如果使用梯度洗脫，則需要將樣品溶解在初始流動相或極性相近的溶劑中。樣品溶液不應(yīng)含有任何顆粒物，使用0.5μm或更小粒徑的濾膜過濾。樣品溶液如果使用強(qiáng)溶劑，為達(dá)到較好峰形，需要降低進(jìn)樣量。
4、流動相
所有流動相，特別是含有緩沖鹽的流動相，當(dāng)日實(shí)驗(yàn)當(dāng)日配制；如果使用了前日配制的流動相，請確保流動相pH值沒有變化，并確保流動相沒有長菌。流動相的pH值取決于您的應(yīng)用和色譜柱填料類型。
希望上述內(nèi)容能夠幫助大家更好的了解本產(chǎn)品。
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