1、接通電源前，先將箱內室用酒精擦凈，再用紫外燈或臭氧殺毒器，殺毒一小時。 
2、在上海培養箱使用時需水箱注水才能正常工作。操作方法：插上電源，旋緊加水接頭，旋開溢水悶頭，將加水水管（用戶自備）接入箱體左側上部加水口，打開電源開關，此時蜂鳴器響，操作面板低水位指示燈亮，當注水至低水位燈滅，繼續注水至溢水口，水溢出。關閉電源，拆除接管及加水接頭。拉出放水管，放掉約100ml水后塞緊放水悶頭，關閉電源開關。 
3、將二氧化碳減壓閥裝在二氧化碳鋼瓶上，接頭處不得有漏氣現象。將減壓閥輸出接頭套上耐壓用膠管，并與二氧化碳培養箱后的進氣接頭相連接，隨后用壓緊圈固緊，壓緊接頭處不得有漏氣。二氧化碳鋼瓶氣體總閥暫不打開。 
4、關機 
關機前應將二氧化碳鋼瓶關閉，將二氧化碳進氣開關置“1”,然后切斷電源。若較長時間不用，則應將水盤取出，將箱內擦干，放盡水箱里的水。在二氧化碳開關置“0”狀態下，箱溫在37℃時通電兩小時保證箱內干燥后，再切斷電源。