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HPLC分析，尤其是正相色譜的分析受溫度的影響特別大，反相分析一般受影響不大，有些物質的分析必須在固定的溫度下進行。之前用鈣柱做過葡萄糖的分析，要求必須柱溫85度。
而在色譜定性方法中，柱溫變化對定性結果的影響如下：
①當采用絕對保留值定性時，其他色譜條件不變，柱溫變化時，保留時間就會發生變化，這樣就直接影響定性結果判斷。
②當采用相對保留值α定性時，α只是柱溫和固定液的函數，只與待測組分的熱力學性質有關，消除了外界因素的影響，因此跟柱溫變化關系不大，但是柱溫變化影響判斷結果。
③當采用保留指數定性時，恒溫分析，保留指數與保留時間有關，而柱溫影響保留時間變化；程序升溫分析，除了保留時間，保留指數還與保留溫度有關。因此，這種定性方法易受柱溫變化影響。
④當采用純樣疊加法定性時，已知混合物中含某組分，將該組分的純樣加入，觀察加入前后的響應信號變化。柱溫變化，保留時間變化，但是加入前后的樣品影響信號變化是一致的，因此柱溫變化不影響采用這種方法定性的結果。
而在定量計算時，經常要用到校正因子，如重量校正因子，和組分的質量以及響應信號有關。柱溫變化，峰高變化，峰面積不變，因此，在柱溫變化不影響峰形正常的前提下，以峰高為響應信號的重量校正因子，受柱溫影響，而以峰面積為響應信號的重量校正因子將不受影響。常見定量方法中，在柱溫波動不影響出峰效果的前提下，對定量結果的影響如下：
①采用歸一化法時，定量時需要各組分的校正因子，當以峰面積為響應信號時，定量結果不受影響，以峰高為響應信號則受影響。
②采用內標法時，需要計算定量校正因子，影響規律和①同。
③采用外標法時，即標準曲線法，當以峰面積為響應信號時，不受影響，但是當以峰高為響應信號時，影響很大。
總之，柱溫變化可能會導致定性、定量分析結果的變化。
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