手機版
化工儀器網手機版
化工儀器網小程序
官方微信
公眾號：chem17
掃碼關注視頻號
你知道NC膜和PVDF膜該怎么選么?今天就讓我們一起來了解一下吧。
1、硝酸纖維素膜
硝酸纖維素膜(NC膜)是蛋白印跡實驗的標準固相支持物。在低離子轉移緩沖液的環境下，大多數帶負電荷的蛋白質會與硝酸纖維素膜發生疏水作用而高親和力的結合在一起，雖然這其中的機制還不是十分清楚，但由于硝酸纖維素膜(NC膜)的這個特性，而且易于封閉非特異性結合，從而得到了廣泛的應用。
在非離子型的去污劑作用下，結合的蛋白還可以被洗脫下來。根據被轉移的蛋白分子量大小，要選擇不同孔徑的硝酸纖維素膜(NC膜)。
因為隨著膜孔徑的不斷減小，膜對低分子量蛋白的結合就越牢固。但是膜孔徑如果小于0.1mm，蛋白的轉移就很難進行了。
從膜的質地上來看，最重要的指標就是單位面積上能夠結合的蛋白的量。硝酸纖維素膜(NC膜)的結合能力主要與膜的硝酸纖維素的純度有關，市場上有些硝酸纖維素膜(NC膜)通常會還有大量的醋酸纖維素，因而降低了蛋白的結合量。如果采用的是100%純度的硝酸纖維素， 保證了最大的蛋白結合量，可達80-150μg/cm2。
由于100%的純度，因而也大大減少了非特異性的結合，降低雜交背景，無需高嚴謹度的洗脫步驟。其次，膜的強度和韌性也是需要考慮的因素。常規的硝酸纖維素膜比較脆，漂洗一兩次就會破損，不能反復使用。
2、PVDF轉移膜
PVDF膜即聚偏二氟乙烯膜(polyvinylidene fluoride)是蛋白質印跡法中常用的一種固相支持物。PVDF本質是一種疏水性的聚合物，在水溶液中不會浸濕，為了在水性緩沖液和系統中使用PVDF膜，首先必須將其浸泡在50%(v/v)或更高濃度的醇溶液中。
(PVDF膜在使用時需預處理，用甲醇處理的目的是活化膜上的正電基團，使其更容易與帶負電的蛋白結合。)甲醇、乙醇和異丙醇都適合浸泡這種膜。隨著膜的外觀從不透明到半透明，*浸濕是顯而易見的。之后必須用水反復沖洗以去除醇類，經預處理的膜可以直接放入轉印緩沖液中平衡。
一旦膜被浸濕，蛋白結合可通過蛋白與膜的接觸而實現。由于蛋白與膜的結合貫穿整個膜的厚度(深度)，結合能力是由孔的內部表面積來決定的，隨著膜孔徑的不斷減小，膜對低分子量的蛋白結合就越牢固。
0.2um PVDF膜內部表面積大約是0.45um PVDF 膜的三倍，使其吸附能力更高。PVDF膜是疏水性的，一般大于20kD的蛋白就可以用0.45μm的膜，小于20kD的蛋白就要用0.2μm的膜。
相關產品
免責聲明
- 凡本網注明“來源：化工儀器網”的所有作品，均為浙江興旺寶明通網絡有限公司-化工儀器網合法擁有版權或有權使用的作品，未經本網授權不得轉載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經本網授權使用作品的，應在授權范圍內使用，并注明“來源：化工儀器網”。違反上述聲明者，本網將追究其相關法律責任。
- 本網轉載并注明自其他來源（非化工儀器網）的作品，目的在于傳遞更多信息，并不代表本網贊同其觀點和對其真實性負責，不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網站或個人從本網轉載時，必須保留本網注明的作品第一來源，并自負版權等法律責任。
- 如涉及作品內容、版權等問題，請在作品發表之日起一周內與本網聯系，否則視為放棄相關權利。
采購中心