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大容量低速冷凍離心機(jī)的實(shí)際運(yùn)用分享
大容量低速冷凍離心機(jī)結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、安裝方便、操作容易，能保持產(chǎn)品的晶粒形狀，采用彈性支撐結(jié)構(gòu)，能減少由于不均勻負(fù)載引起的振動(dòng)，其運(yùn)轉(zhuǎn)平穩(wěn)。能實(shí)現(xiàn)密封，避免對(duì)物料的污染。
下面咱們來(lái)了解下采用大容量低速冷凍離心機(jī)提染色體DNA，可直接應(yīng)用于常規(guī)的分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)，包括PCR、限制性內(nèi)切酶的切割，以及基因組文庫(kù)的構(gòu)建的實(shí)際應(yīng)用：
1、取1ml過(guò)夜培養(yǎng)菌液于8000g，離心機(jī)離心2min。去除培養(yǎng)基后，用400ulSTE緩沖液（100mMNaCl，10mMTris/HCl，1mMEDTA，pH8.0）重懸菌體，按相同條件離心清洗菌體兩次。
2、收集的菌體用200ulTE緩沖液（10mMTris/HCl，1mMEDTA，pH8.0）懸起后加約50mg直徑425-600um規(guī)格的玻璃珠，再加入100ulTirs飽和苯酚。
3、上述混合液在漩渦振蕩器上振蕩（細(xì)菌，振蕩60s；酵母，振蕩120s-200s），隨后于4℃，13000g，離心5min。
4、吸取上層水相（約160ul）轉(zhuǎn)移至一個(gè)新的離心管中，加TE緩沖液補(bǔ)至200ul，再加入100ul氯仿混勻后，于4℃，13000g，離心5min。重復(fù)此步兩到三次。
5、轉(zhuǎn)移上層水相（約160ul）至一個(gè)新的離心管中，補(bǔ)加40ulTE和5ulRNase（10mg/ml），37℃消化10min。
6、加入100ul氯仿混勻于4℃，13000g，離心5min。
7、轉(zhuǎn)移上層水相（約150ul）至一個(gè)新的離心管中。
8、至此，上層水相即含有純化好的基因組DNA，可直接用于隨后的常規(guī)分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。
希望上述內(nèi)容能夠幫助大家更好的了解本產(chǎn)品。
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