體外生長的細胞對微生物及一些有害有毒物質無任何抵抗力,挑選血清是一個很艱難的決定,有些血清可能前期養細胞沒有看到多大的問題,但是養著養著細胞突然暴斃,之前我們一直以為是細胞或者培養基的問題 ,后來給血清做完質譜之后,發現血清里含有的生長激素竟然是人體可以承受的幾倍;以下我們分享一些挑選血清的細節:
首先,我們來看血清的成分及主要作用:
(1)提供基本營養物質
(2)提供貼壁和擴展因子
(3)提供激素及各種生長因子
(4)提供結合蛋白
(5)對培養中的細胞提供某些保護作用
怎么挑選血清:
判斷血清質量首先從外觀入手。
好的血清應該是透明清亮,土黃色或棕黃色,無沉淀或極少量沉淀,比較粘稠。
如發現血清渾濁、不透明、含許多沉淀物,說明血清污染或血清中的蛋白變性;
若血清呈棕紅色,說明血清中的血紅蛋白含量太高,取材時有溶血現象;
如果搖晃時感覺液體稀薄,說明血清中摻入的生理鹽水太多。
怎么儲存和使用血清:
(1)使用前的處理 :大部分血清在使用之前必須經過滅活處理,即56℃放置30分鐘。滅活的目的是去除血清中的補體成分,避免補體對細胞產生細胞毒作用,一句話基本價格在2500以下的最好都滅活處理
(2)儲存條件 :血清一般儲存于-20℃,同時應避免反復凍融,避免反復凍融的辦法就是分裝保存,我司提供的胎牛血清適用于95%以上的細胞培養。
(3)血清使用濃度:使用濃度一般為5%~20%,較為常用的是10%。
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