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Echelon推出納米抗體--駝類HCAb由兩個單可變結構域重鏈組成

來源:默瑞(上海)生物科技有限公司   2021年09月28日 09:35  


  In partnership with Gulliver Biomed, Echelon Biosciences is proud to introduce a new line of nanobodies for cellular and molecular applications. These nanobodies have already been validated for some common applications including ELISA and immunoprecipitation. See what we have to offer or contact us below.

駝類HCAb由兩個單可變結構域重鏈組成,其大小比傳統抗體小得多。重要的是,可以分離HcAbs的單可變結構域(VHH),并保持與完整HcAbs觀察到的結合特性。產生的VHH抗體被命名為“納米抗體”,因為其分子量約為15 kDa。

圖1.png

傳統抗體、重鏈抗體和納米抗體的示意圖比較。VH=重鏈可變域,VL=輕鏈可變域,VHH=單可變域重鏈。IgG抗體的大小約為150 kDa,HcAb為50 kDa,相應的納米體為15 kDa。

納米抗體的生產

通過用感興趣的抗原免疫動物(在本例中為駱駝或羊駝),產生靶向特異性納米抗體開始類似于傳統抗體生產。然后從動物的簡單血液中提取含有感興趣的HCAb的免疫細胞。由于VHH的cDNA具有良好的特征,因此可以分離這些細胞的mRNA并進行PCR擴增,以生成僅用于VHH的序列。然后可以通過噬菌體展示克隆和篩選這些基因,并將結果轉移到細菌或哺乳動物表達載體上進行大規模生產。一旦這些命中的DNA序列被識別和克隆,產生的結構就可以進行進一步的操作,例如添加親和標簽或細胞靶向序列。給定納米抗體的cDNA的可用性也消除了多克隆抗體可能產生的批次間變異的障礙或擔憂。

納米抗體的應用

納米抗體在細胞和體內成像領域具有明顯優勢。它們的尺寸使它們成為超分辨率顯微鏡(super-res)的理想工具。根據方法學的不同,細胞中的單個蛋白質顆粒通??梢酝ㄟ^super-res定位到20-50nm。

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