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人DNA甲基轉移酶1ELISA檢測試劑盒?洗滌方法

來源:上海一研生物科技有限公司   2021年09月28日 16:37  

人DNA甲基轉移酶1ELISA檢測試劑盒洗滌方法:

1. 自動洗板機:每孔加入洗滌液350μl,注入與吸出間隔60秒。洗板5次。

2. 手工洗板:甩盡孔內液體,在潔凈的吸水紙上拍干,每孔加洗滌液350μl,浸泡1-2分鐘,吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標板內的液體,在厚的吸水紙上拍干。洗板5次。

實驗開始前,各試劑均應平衡至室溫;試劑或樣品配制時,均需充分混勻,并盡量避免起泡。

1.加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣時將樣品加于酶標板底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。給酶標板覆膜,37℃孵育2小時。為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。

2.棄去液體,甩干,每個孔中加入Detection Ab工作液 100μl(在使用前15分鐘內配制),酶標板加上覆膜,37℃溫育1小時。

3.棄去孔內液體,甩干,洗板 3次,每次浸泡1-2分鐘,大約350μl /每孔,甩干并在吸水紙上輕拍將孔內液體拍干。

4.每孔加HRP Conjugate工作液(臨用前15分鐘內配制)100μl,加上覆膜,37℃溫育1小時。

5.棄去孔內液體,甩干,洗板5次,方法同步驟3。

6.每孔加底物溶液100μl,酶標板加上覆膜37℃避光孵育15分鐘左右(根據實際顯色情況酌情縮短或延長,但不可超過30分鐘。當標準孔出現明顯梯度時,即可終止)。

7.每孔加終止液50μl,終止反應,此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。

8.立即用酶標儀在450nm波長測量各孔的光密度(OD值)。應提前打開酶標儀電源,預熱儀器,設置好檢測程序。

9.實驗完畢后將未用完的試劑按規定的保存溫度放回冰箱保存至有效期結束。

BALB/C小鼠肝上皮細胞;BNL 1ME A.7R.1

小鼠結腸癌細胞;CT26.WT [CT26WT]

小鼠睪丸畸胎瘤細胞;F9

小鼠網織細胞肉瘤;M5076

小鼠正常肝細胞;NCTC 1469 [NCTC1469]

小鼠神經母細胞瘤細胞;Neuro-2a [N2a; Neuro-2a]

正常小鼠睪丸Leydig細胞;TM3

正常小鼠睪丸Sertoli細胞;TM4

615小鼠乳腺癌瘤株;Ca759

615小鼠乳腺癌瘤株;Ca761

615小鼠乳腺癌瘤株;Ca763

615小鼠T細胞性白血病瘤株;L7712

615小鼠T細胞性白血病瘤株;L7912

615小鼠肺癌瘤株;HP615

615小鼠滑膜肉瘤瘤株;ZM755

615小鼠乳頭狀肺腺癌瘤株;P615

小鼠肝癌瘤株;H22

615小鼠前胃癌瘤株;Fc

KM小鼠子宮頸癌瘤株;U14

KM小鼠子宮頸癌瘤株;U27

KM小鼠網織細胞肉瘤瘤株;LⅡ

KM小鼠腦神經膠質母細胞瘤瘤株;G422

615小鼠網織細胞性白血病瘤株;L615

艾氏腹水瘤瘤株;Ehrlich

T739小鼠肺腺癌瘤株;LA795

小鼠肉瘤瘤株;S180

C57小鼠黑色素瘤瘤株;ME (Me)

615小鼠樹突狀細胞肉瘤瘤株;DCS

KM小鼠未分化神經膠質瘤瘤株;B22

小鼠黑色素瘤瘤株;B16

小鼠Lewis肺癌瘤株;LLT

BALB/C小鼠肝瘤株;BNL 1ME A.7R.1

小鼠黑色素瘤細胞;B16-F1

小鼠T淋巴瘤細胞(雞OVA基因修飾);E.G7-OVA

小鼠骨髓瘤細胞;P3/NSI/1-Ag4-1

小鼠B細胞雜交瘤細胞;W6/32

雜交瘤(B類);Z51B3C10H12A12G2F7B5


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