上樣緩沖液即loading buffer，是蛋白質(zhì)、核酸DNA與RNA的研究實(shí)驗(yàn)中溶解和添加樣品時(shí)所用的一類(lèi)上樣緩沖液，蛋白質(zhì)、DNA、RNA是不同的樣品，其上樣緩沖液也有所區(qū)別。

蛋白上樣緩沖液的組成

其緩沖液主要采用Tris-HCl（三羥甲基氨基甲烷鹽酸）或Tris甘氨酸、與EDTA鹽（乙二胺四乙酸二鈉），還需添加SDS，DTT（二硫蘇糖醇），溴酚藍(lán)，甘油等。

蛋白、DNA、RNA的上樣緩沖液區(qū)別

SDS可與蛋白質(zhì)結(jié)合使蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物上帶有大量的負(fù)電荷，這時(shí)蛋白質(zhì)本身的電荷*被SDS掩蓋，消除了各種蛋白質(zhì)本身電荷的差異；SDS還可以斷開(kāi)分子內(nèi)和分子間的氫鍵，破壞蛋白質(zhì)分子的二級(jí)和三級(jí)結(jié)構(gòu)。DTT可以斷開(kāi)半胱氨酸殘基之間的二硫鍵，破壞蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，消除了蛋白結(jié)構(gòu)之間的差異。最終無(wú)電荷及結(jié)構(gòu)上差異的蛋白（亞單位），電泳速度只是與其分子量大小有關(guān)。溴酚藍(lán)用作電泳時(shí)的指示劑，可大概指示電泳結(jié)束的時(shí)間。

核酸上樣緩沖液的組成

核酸包括DNA與RNA，其上樣緩沖液主要含有Tris-HCl，以及染料二甲苯青FF、溴酚藍(lán)（指示劑）等。指示劑溴酚藍(lán)和二甲苯氰FF起到指示的作用是顯示電泳的進(jìn)程，以便我們適時(shí)終止電泳。DNA與RNA的上樣緩沖液基本可以通用，它們的堿基基本一致，緩沖液中的染料都可與其堿基結(jié)合，跑出條帶。不過(guò)，如果使用DNA上樣緩沖液，里面會(huì)夾雜一些RNA酶，這些酶有可能會(huì)影響到實(shí)驗(yàn)結(jié)果，使用前需要將RNA酶處理掉。

需注意的是，雖然DNA與RNA的上樣緩沖液有時(shí)可以通用，但是它們與蛋白緩沖液是不能通用的。德晟是診斷試劑原料廠家，可提供蛋白與核酸研究相關(guān)的Tris、MOPS、CAPS等多種緩沖劑。