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小鼠皮脂腺的油紅染色實(shí)驗(yàn)步驟

來(lái)源:深圳市安培生物科技有限公司   2021年12月12日 16:07  

材料與儀器


器材:棕色可密封瓶、研缽、漏斗、定性濾紙、冷凍切片等
試劑:

① 油紅染料(稱取預(yù)先研磨粉碎的 0.5 g 油紅干粉,溶于少量異丙醇中,然后加異丙醇至 100 ml,棕色瓶密封(或錫箔紙包裹避光)4 ℃ 保存,為儲(chǔ)存液,可長(zhǎng)期保存。用時(shí)油紅工作液需現(xiàn)配:取 6 ml 加三蒸水 4 ml 混勻,定性濾紙過(guò)濾,稀釋后數(shù)小時(shí)內(nèi)用完)


② 異丙醇


步驟


小鼠皮脂腺的油紅染色實(shí)驗(yàn)的基本過(guò)程可分為如下幾步:

1. 將冷凍切片從冰箱中取出,晾干。

2. 用 PBS 洗 3 次,每次 5 分鐘。

3. 用 4% 多聚甲醛固定 5~10 分鐘。

4. 用蒸餾水洗兩遍,每次 5 分鐘。

5. 將切片放入 60% 異丙醇洗兩遍,每次 5 分鐘。

6. 將切片放入油紅工作液染色 15 分鐘。

7. 用 60% 異丙醇洗兩遍,每次 5 分鐘。

8. 用蒸餾水洗兩遍,每次 5 分鐘。

9. 蘇木素復(fù)染 2 分鐘。

10. 水充分漂洗 10 分鐘,把周圍水分抹干。

11. 封片劑封片,鏡檢。結(jié)果示例如圖 8-11-2 所示。


注意事項(xiàng)


1. 由于脂肪易溶于有機(jī)溶劑,所以顯示脂肪一般不能像石蠟切片一樣處理,而通過(guò)冷凍切片染色來(lái)顯示。
2. 做脂肪染色的冷凍切片不能太薄,過(guò)薄的切片常會(huì)使脂質(zhì)丟失。
3. 蘇木素復(fù)染時(shí)間不能過(guò)長(zhǎng)。
4. 染色結(jié)果不能長(zhǎng)期保存,應(yīng)盡快觀察及照相。


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安培生物科技有限公司介紹:

安培生物堅(jiān)持為生命科學(xué)研究、活體動(dòng)物轉(zhuǎn)染、大規(guī)模生物生產(chǎn)、基因和細(xì)胞治療領(lǐng)域客戶,提供*細(xì)胞體內(nèi)可代謝的核酸轉(zhuǎn)染試劑;inviCELL™Platelet lysate無(wú)動(dòng)物血清產(chǎn)品旨在支持廣泛的細(xì)胞擴(kuò)增和生產(chǎn),包括培養(yǎng)間充質(zhì)干細(xì)胞和多種免疫細(xì)胞系等,為制藥公司或者生物技術(shù)公司提供無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)規(guī)模生產(chǎn)服務(wù);提供以植物生物為平臺(tái)基因序列全人源化、*的細(xì)胞培養(yǎng)可分解3D基質(zhì)膠產(chǎn)品;提供內(nèi)毒素≦ 1.0 EU/mL、對(duì)細(xì)胞無(wú)毒性影響、高純度的一型膠原蛋白產(chǎn)品。安培生物專注為生物醫(yī)藥領(lǐng)域提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù),努力發(fā)展為基因治療、細(xì)胞治療的生物科技企業(yè)。


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