操作ATCC細胞培養的具體方法，通蔚試劑（上海）有限公司生產的ATCC細胞，有門的生物技術售后團隊，實驗中需要技術指導的話，可bo打公司技術線，有一對一的咨詢解答服務。

基本原理

經過在支持物（如蓋玻片）上培養貼壁細胞，能夠應用抗體檢測細胞表面抗原的表達或進行酶細胞化學以及免疫細胞化學檢測。該方法的長處是細胞貼壁健壯，能夠保持細胞生長時的情況。

試劑和設備細胞懸浮液；6孔平底安排培養板，或φ60 mm培養皿；

18mm x 18mm 或20mm x 20mm浸于75%乙醇中的蓋玻片；

含血清培養基（通常為 RMPI 1640,含10% 小牛血清，100U/ml青霉素，100μg/ml鏈霉素）；

超凈工作臺； CO2孵箱；蓋片鑷；

操作步驟
1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭潔凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片悄悄放入6孔培養板（每孔一片）或培養皿中（每個平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；

4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中，使蓋玻片*浸在培養液中；

5．將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至掩蓋培養板底部2/3面積時，將培養板取出用蓋片鑷悄悄取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

實驗關鍵及說明
1．本方法適用于貼壁細胞培養，而不適用于懸浮細胞培養，懸浮細胞可運用滴片法；
2．所運用的蓋玻片應該為玻璃制造，并經過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片十分薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．假設需要更多生長情況共同的細胞，能夠運用較大的培養皿，但不宜過大，以防止培養液的浪費和添加污染機
5．假設細胞貼壁生長才能較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并天然曬干。

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