ROC液相分析柱是色譜分析過程中最重要的部分,相當于人體的“心臟”。根據自己要分析的樣品去選擇合適的液相色譜柱,需要考慮不同參數將會造成什么影響,比如粒徑、酸堿性、極性和分子量大小等。即使是液相色譜柱也分很多類型,比如正相、反相、C18柱、親水性色譜柱等等。只有了解影響分析柱性能的因素,才能結合目標分析物的性質、需要達到的分析效果及實驗室條件來選擇適合的色譜柱。
影響ROC液相分析柱性能的因素有哪些呢?
一、硅膠純度
硅膠純度對峰形有很大液相,硅膠雜質和殘留的金屬離子會影響樣品的峰形,如果硅膠表面的金屬含量高會影響堿性化合物的峰形,易發生拖尾。恒譜生USHAC18色譜柱以全覆蓋的鍵合硅膠為填料,具有優異的穩定性、重復性、高選擇性和高分離度等特點。
二、顆粒形狀及粒徑
球形顆粒柱效高、重現性好、柱床結構均勻;不規則的顆粒柱床結構不均勻、流動相線速度不均勻,容易形成譜帶展寬;平均顆粒直徑,粒徑越小,柱效越高,柱壓也越高。粒徑分布越廣則柱效越低,壓力越大。恒譜生色譜填料均采用球形形狀,金屬雜質<10ppm,具有柱效高和峰形好等特點,可用于分離極性和堿性的有機化合物。
三、顆粒表面積
相對而言,高表面積對樣品具有較強的保留能力,更大的柱容量和分離度。而低表面積能更快達到平衡狀態,更適合梯度洗脫程序。
除了以上這些因素,還有諸如鍵合類型及鍵合相、碳覆蓋率等因素影響。單體鍵合方式可以提高傳質速率,縮短柱平衡時間;聚合體鍵合方式可以增加色譜柱穩定性,增加載樣量。鍵合相的不同會直接影響化合物的保留行為。而高碳覆蓋率可以提高分辨率和重現性,但分析時間長。
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