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今天上午，我們吳公司接到了中山大學王總的談話。王總在2017年連續買了6個ELISA試劑盒。上周王總，我們公司技術上說他想測試自己的試劑盒，看看檢測效果。在王老師和吳老師的談話中，他說：“我的測試結果不太理想，不知道是哪里出了問題，您能幫我找出原因嗎？”王老師組織了對結果的技術分析。來自Elisa  的測試。

王老師的主要問題是：我自己合成了一個8個氨基酸的短抗原肽，和BSA偶聯后免疫動物。1個月后，我用ELISA測定血清中針對短抗原肽的抗體效價。具體步驟：用碳酸緩沖液將抗原肽溶解后，包被板，4冷藏18小時，然后用1% OVA在37密封2小時，洗板3次。待分析血清用10%小牛血清稀釋2次，37度孵育1小時，洗滌3次，加入二抗，37度孵育40分鐘，洗滌3次，加入TMB顯色。陰性對照也顯色，DO值與陽性對照沒有顯著差異。這是什么原因？是搓衣板的問題嗎？

十分鐘后，技術人員回復王先生，可以從以下幾個方面進行分析：

1、如果洗板是有孔的，如果孔是連接的，可能會造成污染，每次洗板時請洗一抗和二抗5次以上。

2.關于阻塞溶液的問題，他說陰性對照也顯色，所以主要問題應該是阻塞。您需要重新考慮OVA  阻斷是否足夠。如果OVA的阻斷效果不好，可以選擇其他阻斷方案。有很多與密封解決方案選擇相關的出版物，您可以搜索和查看它們。

3、建議將ELISA試劑盒在37度下包被兩個小時，這樣效果會更好。

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