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細菌專用蛋白酶抑制劑混合液實驗步驟

來源:上海一研生物科技有限公司   2022年03月01日 15:49  

細菌專用蛋白酶抑制劑混合液實驗步驟:

①取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。

②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。

③RNA沉淀 將水相上層轉移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊。

④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃下7000rpm離心5分鐘。

⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。

⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。

內皮細胞分化G蛋白偶聯受體8抗體

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磷酸化真核啟動因子2α抗體

長鏈脂肪酸延長酶ELOVL2抗體

長鏈脂肪酸延長酶長ELOVL5抗體

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核輸出蛋白5抗體

腸致病性大腸桿菌抗體

E4F轉錄因子1抗體

睪酮調節細胞凋亡誘導和腫瘤抑制基因抗體

聚合酶延伸因子2抗體

聚合酶延伸因子抗體

神經生長因子調控抑制蛋白抗體

內皮細胞分化鞘脂G蛋白偶聯受體1抗體

紅細胞分化相關因子1抗體

微管相關蛋白樣蛋白3抗體

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