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小鼠條件性恐懼模型的建立

小鼠購入后適應性飼養6d，實驗當天提前1h放入實驗間。不同品系小鼠放入電擊箱內（A環境） 自由探索 2min（適應期）后，給與30s聲音刺激 （85dB，5000Hz），后2 s伴隨給與不可逃避的足底 電擊（0.6mA，持續2s），聲音-電擊共配對5次，每 次間隔2min。計算機軟件記錄各個階段（包括適應期、5輪聲音刺激期和5輪間歇期）的僵住時間，僵住 時間百分率（%）=僵住時間（s）/總時間（s）×100%。 僵住行為是嚙齒類動物表達恐懼的方式，表現為除 呼吸運動外全身其余的肌肉運動均消失。

02

場景恐懼和聲音線索恐懼表達的檢測

場景恐懼表達檢測：條件性恐懼訓練24h后， 將小鼠再次置于接受過電擊的裝置（環境A：足底電 柵欄+白光）中，不給與任何刺激，進行環境重現，使用VisuTrack軟件（上海欣軟）記錄5min內的僵住時間（Freezing時間），計算僵住時間百分率，評價小鼠場景條件恐懼表達的特點。

聲音線索恐懼表達檢測：場景恐懼檢測2h后， 將小鼠置于新環境（環境B：三角形半透明黑色套 盒+白色底板+無白光）中，2min適應期后進行30s聲音刺激，聲音刺激結束30s后將動物取出，記錄各個階段（包括適應期、聲音刺激期和間歇期）的僵住時間，計算僵住時間百分率，用于評價3種品系小鼠線索條件恐懼表達的特點。

03

條件性恐懼的自然消退

以C57小鼠為研究對象，分別于條件性恐懼訓練后第2，7，14，21和28天對其場景恐懼和聲音線索恐懼進行檢測，以評價該品系小鼠條件性恐懼的自然消退特點。其中，場景恐懼檢測5min內僵住 時間（環境A，無聲音信號，不電擊），聲音線索恐懼檢測 30s聲音刺激期內僵住時間（環境B，不電擊， 2min適應+30s聲音信號+30s間歇），計算僵住時間百分率。

04

聲音線索恐懼消退訓練和消退保持測試

以 C57小鼠為研究對象，在條件性恐懼訓練（方法見第一段）后24h進行聲音線索恐懼消退訓練， 消退訓練結束后24h進行消退保持測試。

消退訓練方法：將C57小鼠放入B環境電擊箱中，適應 2min后，采用“30s聲音刺激+30s間歇期”方法給 與10次聲音刺激，計算機軟件記錄適應期、10輪聲 音刺激階段和10輪間歇期的僵住時間，計算僵住時 間百分率，作為消退訓練成績。

消退保持測試方法：將 C57小鼠放入B 環境電擊箱中，適應2min 后，給與30s聲音刺激1次，刺激結束30s后將動 物取出，記錄不同階段（適應期+30s聲音刺激期+ 30s間歇期）內僵住時間并計算僵住時間百分率， 作為消退保持成績。

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文章引用（節選）

中國藥理學與毒理學雜志2020年2月第34卷第2期，薛瑞，魏肇余，張森品，陳紅霞，李云峰，張有志，《小鼠條件性恐懼模型的建立和品系敏感性研究》